Test tal-PCR fil-ħin reali tal-fluworexxenza Enterobacter sakazakii

salmonella

PCR fluworexxenti f'ħin reali sejbien in vitro ta 'enterobacter sakazakii.

Speċifikazzjoni: 96 T / kaxxa
Il-kit huwa maħżun fi 2 - 8 ℃.
Il-perjodu ta 'validità huwa ta' 12-il xahar.
Speċifikazzjoni: 96 T / kaxxa

Użi: PCR fluworexxenti f'ħin reali sejbien in vitro ta 'enterobacter sakazakii.

Prinċipju ta 'sejbien: Il-kitt fih primers speċifiċi għal enterobacter sakazakii. Meta l-kampjun ikun fih enterobacter sakazakii, l-enterobacter sakazakii DNA estratt wara l-arrikkiment minn qabel jiġi amplifikat b'mod esponenzjali bil-PCR. Matul ir-reazzjoni, is-sonda fluworexxenti speċifika għal enterobacter sakazakii ibridizza ma 'l-aċidu nuklejku fil-mira u hija simultanjament taq l-enżima Idroliżi biex tissepara l-grupp fluworexxenti mill-grupp ta' tifi fuq is-sonda: sabiex il-preżenza ta 'enterobacter sakazakii tkun tista' tiġi ġġudikata f'ħin reali minn iż-żieda florexxenti.

Prodott u kompożizzjoni:
Kompożizzjoni (96T / kit)Speċifikazzjonikwantità
Soluzzjoni ta 'estrazzjoni tad-DNA3mlTubu 1
Soluzzjoni ta 'reazzjoni ta' Enterobacter sakazakii PCR1100ulTubu 1
Tektek enżima (5U / ul)20ulTubu 1
Enterobacter sakazakii kontroll pożittiv40ulTubu 1
Enterobacter sakazakii Kontroll Negattiv0.5mlTubu 1
Istruzzjoni manwali1
Kundizzjonijiet tal-ħażna u data ta 'skadenza tal-kit:
1. Il-kit huwa maħżun fi 2 -8 ℃.
2. Il-perjodu ta 'validità huwa ta' 12-il xahar.

Strumenti applikabbli:
Serje ABI7500, 9600, MJ opticon2, Bio-Rad u strumenti oħra fluworexxenti kwantitattivi tal-PCR huma disponibbli

Metodu sperimentali:
1. Ħu 1ml tas-soluzzjoni ta 'arrikkiment f'tubu ta' ċentrifuga sterili ta '1.5m1, iċċentrifuga f'10.000rpm għal 5min, u armi s-supernatant; uża l-metodu klassiku ta 'estrazzjoni tal-kloroform tal-fenol biex tittestja l-mudell estratt jew aħżnu f'20C sakemm jiġi ttestjat.
2. Poġġi s-soluzzjoni tar-reazzjoni tal-PCR f'temperatura tal-kamra biex tibbilanċja, ħu l-enżima Taq wara li tidwib, u żid l-enżima Taq f'2∪ / tubu, jiġifieri, kull sistema ta 'reazzjoni tat-test hija ppreparata bħala: Soluzzjoni ta' reazzjoni tal-PCR 22.5u1 + 0.4ulTaq enżima.
3. Żid il-mudell: Ħoll l-estratt ta 'aċidu nuklejku maħżun f'temperatura ta' -20 ° C f'temperatura tal-kamra u ċċentrifuga f'13,000 rpm għal 5 minuti. Il-kontrolli negattivi u pożittivi huma mdewba f'temperatura tal-kamra qabel l-użu. F'kull tubu ta 'reazzjoni PCR, żid 2 ul tal-mudell jew kontrolli negattivi u pożittivi pproċessati fil-pass 1, għatti t-tubu, poġġi fuq l-istrument PCR, u rreġistra n-numru tal-kampjun korrispondenti.
4. Żona ta 'amplifikazzjoni u sejbien abbord: il-kundizzjonijiet tar-reazzjoni huma 95C: 3min, 1 ċiklu; 95C: 5sec, 60C: 40sec (akkwist tas-sinjal), 40 ċiklu. Is-sistema ta 'reazzjoni kienet issettjata għal 25u1.
Għall-istrument PCR ta 'fluworexxenza b'ħafna kanali, is-sinjal huwa ssettjat għal Fam fluorescein.

Ġudizzju tar-riżultati:
Jekk jogħġbok irreferi għall-manwal għad-dettalji.

Prekawzjonijiet għall-użu tal-kit:
1. Dan il-kit jintuża biss għal skopijiet ta 'ttestjar u riċerka in vitro, jekk jogħġbok aqra t-test sħiħ ta' dan il-manwal b'attenzjoni qabel ma tibda tużah.
2. L-esperiment għandu jkun maqsum strettament: żona ta 'preparazzjoni ta' qabel il-PCR-ipprepara reaġenti sperimentali; erja tal-ipproċessar tal-kampjun - kampjuni li għandhom jiġu ttestjati, ipproċessar tal-mudell; żona ta 'skoperta-PCR amplifikazzjoni, skoperta.
3. Għall-istandards rilevanti tal-immaniġġjar tal-laboratorju, jekk jogħġbok irreferi għall-implimentazzjoni tal-istandards tal-immaniġġjar għal-laboratorji tal-amplifikazzjoni tal-ġene maħruġa mill-awtoritajiet nazzjonali rilevanti.

Jekk trid tkun taf aktar, jekk jogħġbok ikkuntattjana

    Mistoqsijiet trivia: Enterobacter sakazakii

    Dwar enterobacter sakazakii

    X'inhu enterobacter sakazakii

    Enterobacter sakazakii (ES) huwa parassitiku Gram-negattiv mhux Bacillus fl-imsaren tal-bnedmin u l-annimali, li jappartjeni għall-familja Enterobacteriaceae. Jistgħu jikkawżaw mard lill-bnedmin u l-annimali taħt ċerti kundizzjonijiet, u għalhekk jissejħu patoġeni kondizzjonali.

    Il-perikli ta 'enterobacter sakazakii

    Enterobacter sakazakii jista 'jikkawża meninġite severa tat-twelid, enterokolite, batterjemja, u disfunzjoni newroloġika. Fl-1961, ir-Renju Unit l-ewwel irrapporta żewġ każijiet ta 'meninġite kkawżata minn Enterobacter sakazakii. Aktar tard, l-Istati Uniti, l-Olanda, u l-Kanada u pajjiżi oħra suċċessivament irrappurtaw infezzjonijiet tat-twelid Enterobacter sakazakii. Trabi infettati bl-Enterobacter sakazakii għandhom rata ta 'mortalità għolja sa 20% -50%, u trabi li għadhom ħajjin u tfal żgħar jista' jkollhom ukoll segwelli newroloġiċi severi.

    Marda Enterobacter sakazakii

    Fl-1961, żewġ xjenzati, Urmenyi u Franklin fir-Renju Unit, irrappurtaw għall-ewwel darba żewġ każijiet ta ’meninġite kkawżata mill-batterju, segwiti minn meninġite, settiċemija, u kolon tal-musrana ż-żgħira necrotizing ikkawżati minn Enterobacter sakazakii f’rapporti suċċessivi madwar id-dinja.

    Infezzjoni Enterobacter sakazakii fit-tarbija tat-twelid

    Każijiet ta 'tifqigħ sporadiku u ta' meninġite, settiċemija, u kolite nekrotizzanti kkawżati minn Enterobacter sakazakii fi trabi u trabi prematuri dehru wara xulxin fid-dinja. Diversi studji wrew li l-formula tat-trabi bħalissa hija l-kanal ewlieni ta 'infezzjoni misjuba li tikkawża meninġite, sepsis u kolite nekrotizzanti fi trabi u trabi li twieldu qabel iż-żmien. F'xi każijiet, il-mortalità kkawżata minn mard ikkawżat minn Enterobacter sakazakii tista 'tilħaq 40% ~ 80%. Enterobacter sakazakii ġibed l-attenzjoni ta 'dipartimenti rilevanti f'ħafna pajjiżi madwar id-dinja.

    Sintomi ta 'Enterobacter sakazakii

    Ħafna tfal għandhom sintomi kliniċi ħfief u atipiċi u huma faċilment injorati. Każijiet severi jistgħu jikkawżaw enterokolite nekrosanti, sepsis u meninġite.
    (1) Sintomi tas-sistema: Deni. It-trabi tat-twelid jistgħu juru sinjali ta ’ipotermja, depressjoni mentali, rifjut tal-ħalib, suffejra miżjuda, jbiddel griż, ġilda mqaxxra u anke xokk.
    (B) Sintomi tas-sistema diġestiva: rimettar, distensjoni addominali, dijarea, ippurgar imdemmi mukus, ħsejjes tal-musrana jiddgħajfu jew saħansitra jisparixxu, f'każijiet severi, jistgħu jseħħu perforazzjoni tal-musrana u peritonite.
    (3) Sintomi tas-sistema nervuża: irritabilità, biki qawwi, ngħas u anke koma, ħarsa, konvulżjonijiet jistgħu jidhru, eżami fiżiku jista 'jinkludi ċirkonferenza tar-ras imkabbra, kraniotomija maqsuma, tensjoni bregma miżjuda, u sinjali pożittivi ta' irritazzjoni meninġea.

    Trattament Enterobacter sakazakii

    (1) Każijiet ħfief għandhom jissaħħu u jiġu ttrattati b'mod sintomatiku biex jiġi żgurat it-teħid ta 'fluwidi u elettroliti, u tingħata attenzjoni għas-segwitu.
    (2) Dawk li għandhom sintomi intestinali ovvji għandhom jagħżlu mediċini antibatteriċi. Amoxicillin / clavulanic acid u mediċini antibatteriċi oħra jistgħu jintgħażlu u jiġu aġġustati skond ir-riżultati tat-testijiet ta 'suxxettibilità tad-droga. Aġenti protettivi tal-mukuża intestinali u aġenti mikroekoloġiċi jistgħu jintużaw fl-istess ħin.
    (3) F'każijiet severi, ceftazidime, cefepime, melopenem, eċċ. Jistgħu jintużaw għal trattament antibatteriku, u aġġustati skond l-effett tat-trattament kliniku u r-riżultati tat-test tas-sensittività tad-droga. It-trattament ta 'appoġġ sintomatiku għandu jissaħħaħ; tfal b'enterokolite nekrotizzanti għandhom ikunu sawm, dekompressjoni gastrointestinali għandha tingħata lil dawk b'distensjoni addominali severa, u trattament kirurġiku għandu jingħata jekk meħtieġ; tfal bil-meninġite għandhom jingħataw sedazzjoni, tnaqqis fl-ansjetà, tnaqqis fil-pressjoni intrakranjali u kumplikazzjonijiet Trattament; agħti trattament kontra x-xokk fil-ħin meta jkun hemm xokk.

    Kif jiġi trasmess enterobacter sakazakii

    Enterobacter sakazakii huwa Enterobacteriaceae, bacilli Gram-negattivi. Enterobacter sakazakii huwa mqassam ħafna fin-natura u jirriproduċi malajr, iżda mhuwiex reżistenti għas-sħana u jista 'jinqatel permezz ta' pasturizzazzjoni. Enterobacter sakazakii huwa batterja patoġenika kundizzjonalment. F'ċirkostanzi normali, ma jikkawżax ħsara lis-saħħa tal-bniedem, iżda jista 'jikkawża mard għal persuni b'immunità baxxa u trabi, trabi tat-twelid, speċjalment trabi prematuri u trabi b'piż baxx tat-twelid.

    Sorsi ta 'ikel komuni Enterobacter sakazakii

    L-ikel u l-ambjent huma s-sorsi ewlenin tal-kontaminazzjoni E. sakazakii. Ix-xjentisti iżolaw enterobacter sakazakii minn varjetà ta 'ikel u xorb. Diversi materji primi ta 'dan l-ikel u xorb, bħal trab tal-ħalib, prodotti tal-laħam, prodotti tas-sojja, ħobż, eċċ., Jistgħu jiġu infettati bl-enterobacter sakazakii, li jirriżulta fl-iskoperta tal-batterja fil-prodott finali. Fosthom, il-formula tal-ħalib tat-trabi tissejjaħ l-iktar sors ta 'ikel komuni u l-iktar sensittiv ta' enterobacter sakazakii.

    Enterobacter sakazakii fil-formula tat-trabi tat-trab

    Enterobacter sakazakii hija kreatura li teżisti fl-ambjent u tinstab komunement f'faċilitajiet u ambjenti tad-dar fejn tiġi prodotta l-formula tat-trabi. Għalkemm il-formula tat-trabi mhix prodott sterili u tista 'tkun ikkontaminata b'patoġeni li jistgħu jikkawżaw mard serju, jekk il-formula tat-trabi hija ppreparata u maħżuna kif suppost, ir-riskju ta' infezzjoni minn Enterobacter sakazakii jista 'jitnaqqas ħafna. Biex tħejji b'mod sigur il-formula tat-trabi, l-ewwel trid tnaddaf u sterilizza t-tagħmir ta 'l-għalf u l-preparazzjoni.

    Prevenzjoni ta 'Enterobacter sakazakii

    Għall-kontaminazzjoni ta 'Enterobacter sakazakii f'ikel tat-trabi, il-kontaminazzjoni tal-batterja għandha tkun ikkontrollata mis-sors, l-ipproċessar u l-ippakkjar tal-materjali ta' ikel tat-trabi. L-ewwelnett, għandna nsaħħu l-prevenzjoni tat-tniġġis u l-kontroll tal-ingredjenti tal-ikel għat-trabi u t-tfal żgħar. Diżinfettar strett u spezzjoni tal-materja prima għandhom isiru. Il-materja prima kkontaminata għandha tiġi pproċessata fil-ħin. Tidħolx fil-workshop tal-produzzjoni biex tevita t-tniġġis minn materja prima oħra.

    It-tieni, sterilizza b'mod strett ir-rabtiet kollha fil-proċess tal-ipproċessar, bħal ħalq l-operatur, idejn, saqajn, ras, żraben, ħwejjeġ tax-xogħol, brieret, eċċ., Għandhom isiru xogħol iġjeniku. Fl-istess ħin, il-batterja tinqatel kompletament permezz ta 'pasturizzazzjoni, sterilizzazzjoni b'temperatura għolja ħafna jew proċessi oħra ta' temperatura għolja matul l-ipproċessar.

    Biex tiġi evitata l-kontaminazzjoni E. sakazakii, għandha tkun stabbilita wkoll analiżi effettiva tal-periklu u sistema ta ’kontroll tal-kwalità għal punti ta’ kontroll kritiċi u implimentati b’mod strett matul il-proċess ta ’produzzjoni. Barra minn hekk, il-materjali tal-imballaġġ għandhom jiġu diżinfettati b'mod effettiv, u l-ambjent tal-workshop kollu għall-produzzjoni u l-ippakkjar għandu jiġi diżinfettat regolarment.

    Barra minn hekk, fit-tmigħ ta 'trabi u tfal żgħar, peress li hemm ukoll riskju ta' infezzjoni ta 'Enterobacter sakazakii fil-familja, huwa rrakkomandat li fliexken u għodda oħra ta' l-ikel għat-trab tal-ħalib jiġu mnaddfa u ddiżinfettati sewwa. Barra minn hekk, it-treddigħ huwa wkoll wieħed mill-mezzi effettivi biex jitnaqqas ir-riskju ta 'infezzjoni tat-twelid b'E. Sakazakii.

    Identifikazzjoni bijokimika Enterobacter sakazakii

    Metodi ta 'spezzjoni tradizzjonali

    Il-metodu tradizzjonali ta 'separazzjoni u sejbien ta' Enterobacter sakazakii jiddependi fuq karatteristiċi bijokimiċi u morfoloġiċi. Internazzjonalment, "Separazzjoni u Għadd ta 'Enterobacter sakazakii fil-formula tat-trabi" promulgata mill-FDA ta' l-Istati Uniti normalment tintuża bħala l-metodu klassiku.

    Spettrometrija tal-massa tal-ħin ta 'titjir tal-jonizzazzjoni ta' assorbiment bil-lejżer assistita minn matriċi

    Il-metodu tal-ispettrometrija tal-massa tal-ħin tat-titjir tal-jonizzazzjoni tal-lejżer assistit bil-matriċi (MAL-DITOF-MS) huwa li tħallat il-kampjun li għandu jitkejjel mas-soluzzjoni tal-matriċi f'ċertu proporzjon, u tuża l-irradjazzjoni tal-lejżer bl-impulsi biex teċita l-matriċi, u tikkawża l- polimeru biex jiġġenera joni molekulari u polimerizzazzjoni ta 'joni molekulari Il-ġisem jiġi aċċellerat u skopert fi spettrometru tal-massa tal-ħin tat-titjira. Bħala riżultat, il-polimer imkejjel huwa sseparat skont in-numru tal-massa, ipproċessat biex jifforma spettru tal-massa, u analizzat u mqabbel permezz ta 'softwer għall-iskrinjar u jiddetermina l-ispeċifiċità (marki tas-swaba') biex tinkiseb Differenzazzjoni u identifikazzjoni ta 'speċi jew razez ta' mikroorganiżmi fil-mira.

    Metodi ta 'ttestjar tal-bijoloġija molekulari

    Fil-preżent, il-metodi ta 'ttestjar bijoloġiku molekulari ta' E. sakazakii użati fi prodotti tal-ħalib jinkludu metodu PCR ordinarju (metodu ta 'elettroforeżi), metodu ta' ttestjar ta 'amplifikazzjoni kostanti medjata b'ċirku tad-DNA (LAMP) u metodu ta' PCR fluworexxenti. Dan il-metodu jegħleb in-nuqqasijiet ta 'metodi ta' spezzjoni tradizzjonali bħal operazzjoni tqila, li tieħu ħafna ħin, u riżultati diffiċli biex tiddistingwihom. Dan wassal ukoll għall-iżvilupp mgħaġġel ta 'metodi ta' skoperta rapida għal Enterobacter sakazakii. Madankollu, dan il-metodu għandu wkoll l-iżvantaġġi ta 'konċentrazzjoni għolja ta' batterji li għandhom jitkejlu fil-kampjun, spiża għolja ta 'analiżi, operazzjoni ineffiċjenti, u inkapaċità li tidentifika l-preżenza ta' batterja ħajja.

    Karigi riċenti

    tags

    BALLYA ballyabo ballya bio abbuż tal-baqar tal-ħalib vidjo dwar l-abbuż tal-baqar tal-ħalib oġġetti tal-baqar tal-ħalib irkanti tal-baqar tal-ħalib Michigan imġieba tal-baqar tal-ħalib punteġġ tal-kundizzjoni tal-ġisem tal-baqra tal-ħalib partijiet tal-ġisem tal-baqar tal-ħalib tabella għat-tgħammir tal-baqar tal-ħalib baqra tal-ħalib skont il-prodotti kalendarju tal-baqar tal-ħalib kanvas tal-baqar tal-ħalib kartun tal-baqar tal-ħalib clipart tal-baqar tal-ħalib għenuq tal-baqar tal-ħalib kompost tal-baqar tal-ħalib ċiklu tal-baqar tal-ħalib esportaturi tal-baqar tal-ħalib l-awstralja irziezet tal-baqar tal-ħalib irziezet tal-baqar tal-ħalib viċin tiegħi kalkulatur tal-għalf tal-baqar tal-ħalib konsum ta 'għalf tal-baqar tal-ħalib kuljum ħtieġa tal-għalf tal-baqar tal-ħalib ġestjoni tal-għalf tal-baqar tal-ħalib għalf tal-baqar tal-ħalib kuljum razzjonijiet tal-għalf tal-baqar tal-ħalib riċetta tal-għalf tal-baqar tal-ħalib baqra tal-ħalib għall-bejgħ fil-bangladesh baqra tal-ħalib għall-bejgħ fit-tamilnadu mard tas-saqaf tal-baqar tal-ħalib problemi tas-saqaf tal-baqar tal-ħalib baqar tal-ħalib għall-bejgħ fl-afrika t’Isfel baqar tal-ħalib għall-bejgħ qld baqar tal-ħalib għall-bejgħ vic baqar tal-ħalib jiġu maħluba baqar tal-ħalib it-tisħin globali baqar tal-ħalib iridu jkunu tqal l-istorja tal-baqar tal-ħalib baqar tal-ħalib fil-kalifornja kalendarju tal-baqar tal-ħalib dijanjostika in vitro fabbrika tal-ħalib sostitut tat-trab tal-ħalib
    © copyright 2020 - BALLYA riservat.
    pakketthandset tat-telefonmarkatur tal-mapep linkedin Facebook Pinterest YouTube RSS twitter Instagram facebook-vojt rss-vojt linkedin-vojt Pinterest YouTube twitter Instagram