Test tal-PCR fil-ħin reali tal-fluworexxenza E coli

salmonella

PCR fluworexxenti f'ħin reali sejbien in vitro ta 'E coli.

Speċifikazzjoni: 96 T / kaxxa
Il-kit huwa maħżun fi 2 - 8 ℃.
Il-perjodu ta 'validità huwa ta' 12-il xahar.
Speċifikazzjoni: 96 T / kaxxa

Użi: PCR fluworexxenti f'ħin reali sejbien in vitro ta 'e coli.

Prinċipju ta 'sejbien: Il-kitt fih primers speċifiċi għall-e coli. Meta l-kampjun ikun fih e coli, id-DNA tal-e coli estratt wara l-arrikkiment minn qabel jiġi amplifikat b'mod esponenzjali bil-PCR. Matul ir-reazzjoni, is-sonda fluworexxenti speċifika għall-e coli ibridizza ma 'l-aċidu nuklejku fil-mira u hija simultanjament Taq enzyme Hydrolysis biex tissepara l-grupp fluworexxenti mill-grupp ta' tifi fuq is-sonda: sabiex il-preżenza ta 'e coli tkun tista' tiġi ġġudikata f'ħin reali minn iż-żieda florexxenti.

Prodott u kompożizzjoni:
Kompożizzjoni (96T / kit)Speċifikazzjonikwantità
Soluzzjoni ta 'estrazzjoni tad-DNA3mlTubu 1
Soluzzjoni ta 'reazzjoni E coli PCR1100ulTubu 1
Tektek enżima (5U / ul)20ulTubu 1
Kontroll pożittiv tal-E coli40ulTubu 1
Kontroll Negattiv tal-E coli0.5mlTubu 1
Istruzzjoni manwali1
Kundizzjonijiet tal-ħażna u data ta 'skadenza tal-kit:
1. Il-kit huwa maħżun fi 2 - 8 ℃.
2. Il-perjodu ta 'validità huwa ta' 12-il xahar.

Strumenti applikabbli:
Serje ABI7500, 9600, MJ opticon2, Bio-Rad u strumenti oħra fluworexxenti kwantitattivi tal-PCR huma disponibbli

Metodu sperimentali:
1. Ħu 1ml tas-soluzzjoni ta 'arrikkiment f'tubu ta' ċentrifuga sterili ta '1.5m1, iċċentrifuga f'10.000rpm għal 5min, u armi s-supernatant; uża l-metodu klassiku ta 'estrazzjoni tal-kloroform tal-fenol biex tittestja l-mudell estratt jew aħżnu f'20C sakemm jiġi ttestjat.
2. Poġġi s-soluzzjoni tar-reazzjoni tal-PCR f'temperatura tal-kamra biex tibbilanċja, ħu l-enżima Taq wara li tidwib, u żid l-enżima Taq f'2∪ / tubu, jiġifieri, kull sistema ta 'reazzjoni tat-test hija ppreparata bħala: Soluzzjoni ta' reazzjoni tal-PCR 22.5u1 + 0.4ulTaq enżima.
3. Żid il-mudell: Ħoll l-estratt ta 'aċidu nuklejku maħżun f'temperatura ta' -20 ° C f'temperatura tal-kamra u ċċentrifuga f'13,000 rpm għal 5 minuti. Il-kontrolli negattivi u pożittivi huma mdewba f'temperatura tal-kamra qabel l-użu. F'kull tubu ta 'reazzjoni PCR, żid 2 ul tal-mudell jew kontrolli negattivi u pożittivi pproċessati fil-pass 1, għatti t-tubu, poġġi fuq l-istrument PCR, u rreġistra n-numru tal-kampjun korrispondenti.
4. Żona ta 'amplifikazzjoni u sejbien abbord: il-kundizzjonijiet tar-reazzjoni huma 95C: 3min, 1 ċiklu; 95C: 5sec, 60C: 40sec (akkwist tas-sinjal), 40 ċiklu. Is-sistema ta 'reazzjoni kienet issettjata għal 25u1.
Għall-istrument PCR ta 'fluworexxenza b'ħafna kanali, is-sinjal huwa ssettjat għal Fam fluorescein.

Ġudizzju tar-riżultati:
Jekk jogħġbok irreferi għall-manwal għad-dettalji.

Prekawzjonijiet għall-użu tal-kit:
1. Dan il-kit jintuża biss għal skopijiet ta 'ttestjar u riċerka in vitro, jekk jogħġbok aqra t-test sħiħ ta' dan il-manwal b'attenzjoni qabel ma tibda tużah.
2. L-esperiment għandu jkun maqsum strettament: żona ta 'preparazzjoni ta' qabel il-PCR-ipprepara reaġenti sperimentali; erja tal-ipproċessar tal-kampjun - kampjuni li għandhom jiġu ttestjati, ipproċessar tal-mudell; żona ta 'skoperta-PCR amplifikazzjoni, skoperta.
3. Għall-istandards rilevanti tal-immaniġġjar tal-laboratorju, jekk jogħġbok irreferi għall-implimentazzjoni tal-istandards tal-immaniġġjar għal-laboratorji tal-amplifikazzjoni tal-ġene maħruġa mill-awtoritajiet nazzjonali rilevanti.

Jekk trid tkun taf aktar, jekk jogħġbok ikkuntattjana

    Mistoqsijiet trivia: E coli

    Dwar e coli

    E coli, magħrufa wkoll bħala Escherichia coli, ġiet skoperta minn Escherich fl-1885. Escherichia coli hija batterja patoġenika kondizzjonalment. Taħt ċerti kundizzjonijiet, jista 'jikkawża infezzjonijiet gastrointestinali jew infezzjonijiet fl-apparat urinarju ta' diversi tessuti u organi fil-bnedmin u f'diversi annimali.

    Daqs tal-E coli

    Id-daqs huwa 0.5 × 1 ~ 3 mikroni. Chow flagella, jista 'jiċċaqlaq mingħajr du spori. Jista 'jiffermenta varjetà ta' zokkor biex jipproduċi aċidu u gass. Huwa batterju residenti normali fl-imsaren tal-bnedmin u l-annimali. Jidħol fl-imsaren bit-trabi wara t-twelid u jkun akkumpanjat mill-bnedmin għal ħajjithom, li jammontaw għal kważi 1/3 tal-piż niexef tal-ħmieġ.

    Forma ta 'E coli

    E coli huwa Brevibacterium, bi truf tondi ċatti u Gram negattivi. Kultant, minħabba ambjenti differenti, ċelloli individwali jidhru li huma sferiċi jew qishom filament; E. coli huma fil-biċċa l-kbira singoli jew tnejn, iżda mhumiex se jiġu rranġati f'forma ta 'katina twila; il-biċċa l-kbira tar-razez ta 'E. coli għandhom kapsuli jew mikrokapsuli Struttura, iżda ma jistgħux jiffurmaw spori; il-biċċa l-kbira tar-razez tal-E. coli jikbru fimbriae, li wħud minnhom huma fimbriae speċifiċi għall-host li għandhom adeżjoni mal-host u xi tessuti jew ċelloli oħra.

    Klassifikazzjoni E coli

    Effett patoġeniku
    Fil-preżent, il-klassifikazzjoni rikonoxxuta internazzjonalment tinkludi prinċipalment sitt tipi ta 'E. coli, jiġifieri E. coli patoġeniku intestinali (EPEC), E. coli tossiġeniku intestinali (ETEC), u invażjoni intestinali li jistgħu jikkawżaw infezzjonijiet gastrointestinali. E coli (EIEC), E coli emorraġika intestinali (EHEC), E coli intestinali aggregattiva (EAEC) u tossini bħal Shiga intestinali misjuba f'dawn l-aħħar snin għandhom ukoll ċerti E coli invażivi (ESIES) Barra minn hekk, hemm E coli patoġenika uretral ( UPEC) li jista 'jikkawża infezzjoni fl-apparat urinarju, u l-imsemmi għadu kemm għadu intestinali agglomerattiv E. coli (EAggEC).

    Emolitiku
    Skond l-abbiltà ta 'E. coli li tipproduċi l-emolisina u l-abbiltà li temolizza, E. coli tista' tinqasam f'żewġ kategoriji: E. coli emolitika u E. coli mhux emolitika.

    Enterotossiġeniku
    Skond il-kapaċità ta 'E coli li tipproduċi enterotossina matul il-proċess ta' infezzjoni, E coli tista 'tinqasam f'żewġ kategoriji: E coli enterotossigeniċi u E. coli mhux entotossinoġeniċi. E. coli Enterotoxigenic huwa patoġenu importanti ta 'kwalunkwe dijarea infettiva fil-bnedmin u f'diversi annimali. L-identifikazzjoni ta 'E. coli enterotoxigenic hija prinċipalment biex tiddetermina t-tip ta' enterotoxin imnixxi mill-E. coli iżolata. Barra minn hekk, skond il-kapaċità ta 'E. coli li tipproduċi enterotossina, flimkien mas-sensittività tagħha għal enterotossini differenti, E coli tista' tiġi kklassifikata bħala tip ta 'enterotossina.

    Infezzjoni tal-E coli

    E. coli huwa batterja residenti normali fl-imsaren ta 'l-annimali, u parti żgħira minnhom tikkawża mard taħt ċerti kondizzjonijiet. Is-serotipi ta 'E. coli jistgħu jikkawżaw infezzjonijiet gastro-intestinali fil-bnedmin jew l-annimali, prinċipalment ikkawżati minn antiġeni fimbria speċifiċi, tossini patoġeniċi u infezzjonijiet oħra. Minbarra infezzjonijiet gastrointestinali, jistgħu jikkawżaw ukoll infezzjonijiet fl-apparat urinarju, artrite, u meninġi. Infjammazzjoni u infezzjonijiet settiċi.
    Escherichia coli tinkludi diversi gruppi ta 'batterji b'patoġeniċità differenti. Infezzjonijiet tal-E. coli tal-bniedem huma bejn wieħed u ieħor maqsuma f'żewġ tipi: infezzjonijiet intestinali u infezzjonijiet extraintestinali.

    Sintomi ta 'E coli

    L-iktar sintomu tipiku ta 'infezzjoni intestinali jista' jkun dijarea. Jekk l-infezzjoni hija severa, jista 'jseħħ xokk, il-pressjoni tad-demm tista' tonqos, u r-rata tal-qalb tista 'tiżdied. Jekk hija infezzjoni intestinali, dardir, rimettar, deni, frekwenza ta 'l-awrina, u urġenza jistgħu jseħħu wara infezzjoni ta' E. coli.

    Patoġenu E coli

    Ġeneralment, E. coli huwa maqsum f'erba 'gruppi ta' batterji skont il-patoġeniċità tiegħu għall-bnedmin: E. coli komuni, E. coli enteropatoġenika, E. coli enterotossigenika, u E. coli invażiva. It-tlieta tal-aħħar huma batterji patoġeniċi li jikkawżaw dijarea.

    Patoġenesi ta 'E coli

    Kull flora tinkludi ċertu numru ta 'serotipi. Escherichia coli Enterotoxigenic jista 'jipproduċi enterotoxin reżistenti għas-sħana u enterotoxin reżistenti għas-sħana. Il-produzzjoni ta 'dawn iż-żewġ enterotossini hija ġenetikament ikkontrollata minn plażmidi. Il-plażmid huwa tip ta 'DNA mhux kromosomali li jista' jiġi trasmess faċilment. It-trasmissjoni reċiproka ta 'plażmidi tista' tippermetti li r-razez li ma jipproduċux tossini jiksbu kapaċità li jipproduċu t-tossini. Minħabba l-kunsinna tal-plażmid, Escherichia coli ta 'kwalunkwe serotip jista' jipproduċi enterotossina u fattur tal-kolonja, u b'hekk għandu patoġeniċità.

    Trattament tal-E coli

    L-ewwelnett, jekk is-sintomi ta 'infezzjoni mhumiex serji ħafna u d-dijarea u l-uġigħ addominali huma ħfief, l-għoti orali ta' bifidobacteria jista 'jtejjeb il-disfunzjoni gastrointestinali u jirregola d-disturbi tal-mikroflora intestinali.
    Jekk l-uġigħ addominali u d-dijarea huma serji u hemm ippurgar idemmgħu, ikkunsidra li tagħti trattament anti-infjammatorju bħal antibijotiċi quinolone jew berberine, u sostituzzjoni xierqa ta 'fluwidu biex ittejjeb is-sintomi ta' deidrazzjoni.

    Minn fejn ġej l-e coli

    Escherichia coli huwa wieħed mill-aktar mikro-organiżmi komuni, imqassam ħafna fin-natura, li ħafna minnhom mhumiex patoġeniċi, prinċipalment parassiti fl-intestini tal-bnedmin jew annimali, u huma msejħa "flora normali" mill-bnedmin.

    Trasmissjoni ta 'E coli

    Is-sors ewlieni ta 'infezzjoni tal-marda tal-E. coli uman huwa li numru kbir ta' patoġeni tal-E. coli jitneħħew fil-ħmieġ ta 'pazjenti b'infezzjoni gastrointestinali. Ir-rotta ta 'trasmissjoni ta' E. coli fost in-nies hija l-aktar permezz tar-rotta ta 'trasmissjoni fekali-orali, li tista' tikkawża t-tixrid jew l-epidemija tal-marda ta 'E. coli taħt ċerti kundizzjonijiet.

    Enterobacter sakazakii fil-formula tat-trabi tat-trab

    Enterobacter sakazakii hija kreatura li teżisti fl-ambjent u tinstab komunement f'faċilitajiet u ambjenti tad-dar fejn tiġi prodotta l-formula tat-trabi. Għalkemm il-formula tat-trabi mhix prodott sterili u tista 'tkun ikkontaminata b'patoġeni li jistgħu jikkawżaw mard serju, jekk il-formula tat-trabi hija ppreparata u maħżuna kif suppost, ir-riskju ta' infezzjoni minn Enterobacter sakazakii jista 'jitnaqqas ħafna. Biex tħejji b'mod sigur il-formula tat-trabi, l-ewwel trid tnaddaf u sterilizza t-tagħmir ta 'l-għalf u l-preparazzjoni.

    Prevenzjoni tal-E coli

    1. Żomm il-post bai u l-għodda tal-kċina nodfa, u armi sewwa ż-żibel.
    2. Żomm idejk nodfa u aqta 'dwiefer spiss.
    3. Aħsel idejk bis-sapun u l-ilma qabel ma tiekol jew timmaniġġa l-ikel. Għandek ukoll taħsel idejk wara li tuża t-tojlit jew tbiddel il-ħrieqi.
    4. L-ilma tal-vit għandu jintuża għax-xorb, u l-aħjar huwa li tgħallih qabel ma tixrob.
    5. Ikel frisk għandu jinxtara minn post ta 'min joqgħod fuqu, u mhux patronizzanti ta' bejjiegħa bla liċenzja.
    6. Evita li tiekol ikel b'riskju għoli, bħal ħalib li ma ġiex ipproċessat permezz ta 'sterilizzazzjoni f'temperatura baxxa, kif ukoll steaks tal-hamburger mhux imsajjar, ċanga mitħuna, u ikel ieħor tal-laħam.
    7. Meta tkun qed issajjar l-ikel, ilbes fardal nadif u li jinħasel u kappell.
    8. L-ikel għandu jinħasel sewwa.
    9. Ikel li jitħassar għandu jkun mgħotti b'għatu u maħżun fil-friġġ.
    10. Ikel nej u ikel imsajjar, speċjalment ċanga u ġewwieni tal-laħam taċ-ċanga, għandhom jiġu ttrattati u maħżuna separatament (aħżen ikel imsajjar fin-naħa ta ’fuq tal-friġġ u ikel nej fil-qiegħ) biex tiġi evitata l-kontaminazzjoni inkroċjata.
    11. Il-friġġ għandu jitnaddaf u jiddewweb regolarment, u t-temperatura għandha tinżamm f'4 gradi Celsius jew inqas.
    12. Jekk il-partijiet kollha tal-ikel jissaħħnu sa 75 grad Celsius, E. coli O157: H7 jista 'jiġi eliminat; għalhekk, ċanga mitħuna u steak tal-hamburger għandhom ikunu msajra sewwa sa 75 grad Celsius għal 2 sa 3 minuti, sakemm il-laħam imsajjar ikun imdawwar kompletament Huwa kannella, u l-gravy isir ċar.
    13. M'għandekx timmaniġġa ikel imsajjar bl-idejn mikxufa; jekk meħtieġ, ilbes ingwanti.
    14. L-ikel għandu jiġi kkunsmat malajr kemm jista 'jkun wara t-tisjir.
    15. Jekk huwa meħtieġ li jinżamm l-ikel imsajjar li jibqa ', għandu jkun imkessaħ u kkunsmat malajr kemm jista' jkun. Erġa saħħan sew qabel ma tiekol. Ikel imħassar għandu jintrema.

    Test għall-e coli

    Metodu ta 'fermentazzjoni

    Dan il-metodu huwa prinċipalment għall-kultivazzjoni ta 'E. coli fuq medja ta' 44.5 ° C, li fiha substrat fluworexxenti u teħtieġ 24 siegħa ta 'kultivazzjoni. Il-passi ewlenin jinkludu fermentazzjoni, kultura ta ’separazzjoni, fermentazzjoni sekondarja, osservazzjoni ta’ mikroskopju, eċċ.

    Spettrometrija tal-massa tal-ħin ta 'titjir tal-jonizzazzjoni ta' assorbiment bil-lejżer assistita minn matriċi

    Il-metodu tal-ispettrometrija tal-massa tal-ħin tat-titjir tal-jonizzazzjoni tal-assorbiment bil-lejżer assistit mill-matriċi (MAL-DITOF-MS) huwa li tħallat il-kampjun li għandu jitkejjel mas-soluzzjoni tal-matriċi f’ċertu proporzjon, u tuża l-irradjazzjoni tal-lejżer bl-impulsi biex teċċita l-matriċi, u tikkawża l- polimeru biex jiġġenera joni molekulari u polimerizzazzjoni ta 'joni molekulari Il-korp jiġi aċċellerat u skopert fi spettrometru tal-massa tal-ħin tat-titjira. B'riżultat ta 'dan, il - polimer imkejjel huwa separat skond numru tal-massa, ipproċessat biex jifforma spettru tal-massa, u analizzat u mqabbel permezz ta ’softwer biex jgħarbel u jiddetermina l-ispeċifiċità (marki tas-swaba’) biex jikseb Differenzjazzjoni u identifikazzjoni ta ’speċi jew razez ta’ mikroorganiżmi fil-mira.

    Metodu ta 'xoffa immunomanjetika

    Il-prinċipju ewlieni tat-teknoloġija tas-separazzjoni huwa li tuża żibeġ manjetiku bħala trasportatur u antikorp biex tgħaqqad l-antikorp u ż-żibeġ manjetiċi, u mbagħad tlesti l-moviment mekkaniku permezz tat-teknoloġija manjetika biex tissepara E. coli. Meta mqabbel ma 'modi oħra ta' separazzjoni tal-batterja, dan il-metodu għandu ċerti vantaġġi. Din it-teknoloġija tista 'ttejjeb ir-rata ta' suċċess ta 'sejbien ta' Vibrio patoġeniku f'kampjuni, u t-teknoloġija ta 'xoffa immunomanjetika tista' tittratta mikroorganiżmi differenti fi speċi ta 'batterji differenti. , U fil-biċċa l-kbira ttejjeb l-effiċjenza tal-iskoperta.

    Ittestjar awtomatiku tal-istrumenti

    L-użu ewlieni tal-analizzatur immuni awtomatizzat, din it-teknoloġija ġiet prodotta u użata fl-1970. Bl-iżvilupp u l-progress tax-xjenza u t-teknoloġija, it-teknoloġija tal-iskoperta awtomatika tal-istrumenti tintuża ħafna, u huwa konvenjenti ħafna li topera, tista 'tiffranka ħafna ħin , il-grad ta 'interferenza tiegħu huwa żgħir, jista' jiffranka l-ħaddiema u l-input tal-materjal, u jista 'wkoll itejjeb l-eżattezza tas-sejbien. Fil-proċess ta 'żvilupp attwali, l-applikazzjoni ta' sistema awtomatika ta 'immunoassay ta' enżimi hija estensiva ħafna.

    Bioluminixxenza ATP

    Fil-proċess ta 'żvilupp f'dawn l-aħħar snin, it-teknoloġija tal-bijoluminixxenza tintuża ħafna, u hija teknoloġija relattivament mgħaġġla għall-iskoperta ta' mikroorganiżmi. Fiċ-ċelloli attivi, l-ATP huwa l-prodott metaboliku tal-enerġija komuni tiegħu, li jista 'jipprovdi l-enerġija meħtieġa waqt l-attivitajiet fiżjoloġiċi taċ-ċelloli. U, din it-teknoloġija tista 'żżomm ċertu kontenut f'ċertu firxa fil-ġisem ħaj. It-teknoloġija ta 'skoperta ta' Escherichia coli fl-ikel tista 'tadotta l-metodu tal-fotometrija tal-fluworexxenza, minħabba li r-raġuni li l-organiżmu jarmi d-dawl hija r-rwol ta' luciferase, li jipproduċi l-effett ta 'emissjoni ta' dawl. Is-sustanza ġejja mill-fireflies fl-Amerika ta 'Fuq u tista' tikkatalizza l-ossidazzjoni tal-fluorescein. Madankollu, is-sustanza mhix stabbli u tista 'tiddekomponi malajr il-fluworexxenza. Barra minn hekk, il-proċess ta 'akkwist tar-riżultat tat-teknoloġija ta' skoperta huwa mgħaġġel ħafna, u l-apparat huwa faċli biex jinġarr, adattat ħafna għal skoperta fuq il-post.

    Karigi riċenti

    tags

    BALLYA ballyabo ballya bio abbuż tal-baqar tal-ħalib vidjo dwar l-abbuż tal-baqar tal-ħalib oġġetti tal-baqar tal-ħalib irkanti tal-baqar tal-ħalib Michigan imġieba tal-baqar tal-ħalib punteġġ tal-kundizzjoni tal-ġisem tal-baqra tal-ħalib partijiet tal-ġisem tal-baqar tal-ħalib tabella għat-tgħammir tal-baqar tal-ħalib baqra tal-ħalib skont il-prodotti kalendarju tal-baqar tal-ħalib kanvas tal-baqar tal-ħalib kartun tal-baqar tal-ħalib clipart tal-baqar tal-ħalib għenuq tal-baqar tal-ħalib kompost tal-baqar tal-ħalib ċiklu tal-baqar tal-ħalib esportaturi tal-baqar tal-ħalib l-awstralja irziezet tal-baqar tal-ħalib irziezet tal-baqar tal-ħalib viċin tiegħi kalkulatur tal-għalf tal-baqar tal-ħalib konsum ta 'għalf tal-baqar tal-ħalib kuljum ħtieġa tal-għalf tal-baqar tal-ħalib ġestjoni tal-għalf tal-baqar tal-ħalib għalf tal-baqar tal-ħalib kuljum razzjonijiet tal-għalf tal-baqar tal-ħalib riċetta tal-għalf tal-baqar tal-ħalib baqra tal-ħalib għall-bejgħ fil-bangladesh baqra tal-ħalib għall-bejgħ fit-tamilnadu mard tas-saqaf tal-baqar tal-ħalib problemi tas-saqaf tal-baqar tal-ħalib baqar tal-ħalib għall-bejgħ fl-afrika t’Isfel baqar tal-ħalib għall-bejgħ qld baqar tal-ħalib għall-bejgħ vic baqar tal-ħalib jiġu maħluba baqar tal-ħalib it-tisħin globali baqar tal-ħalib iridu jkunu tqal l-istorja tal-baqar tal-ħalib baqar tal-ħalib fil-kalifornja kalendarju tal-baqar tal-ħalib dijanjostika in vitro fabbrika tal-ħalib sostitut tat-trab tal-ħalib
    © copyright 2020 - BALLYA riservat.
    pakketthandset tat-telefonmarkatur tal-mapep linkedin Facebook Pinterest YouTube RSS twitter Instagram facebook-vojt rss-vojt linkedin-vojt Pinterest YouTube twitter Instagram