Listeria monocytogenes fluorescence whakamātautau PCR wā-tūturu

Salmonella

Te wa-roa PCR fluorescent i te kitenga vitro o Listeria monocytogenes.

Whakatakotoranga: 96 T / pouaka
Kei te rongoa te kete i te 2 - 8 ℃.
Ko te waa whaimana he 12 marama.
Whakapūtātanga: 96 T / pouaka

Whakamahinga: Te wa-roa PCR fluorescent i te kitenga vitro o Listeria monocytogenes.

Te kaupapa rapu: Kei roto i te kete nga Listeria monocytogenes-motuhake motuhake. Mena kei roto i te tauira nga monomettogenes Listeria, ko te Listeria monocytogenes DNA i tangohia i muri o te whakarangatiratanga i kaha whakarahihia e PCR. I te wa o te uruparenga, ko te Listeria monocytogenes-motuhake te whakamatau i te uiui hukahuka me te waikawa ngongo ngongo, me te wa ano Taq whākōkī Hydrolysis ki te wehe i te roopu fluorescent mai i te roopu tarai i runga i te tirotiro Tuhinga o mua.

Hua me te hanganga:
Tito (96T / kete)WhakapūtātangaRahinga
Rongoā tangohanga DNA3ml1 ngongo
Listeria monocytogenes PCR otinga tauhohenga1100ul1 ngongo
Paoa whākōkī (5U / ul)20ul1 ngongo
Listeria monocytogenes te whakahaere pai40ul1 ngongo
Listeria monocytogenes Whakahaere kino0.5ml1 ngongo
Pukapuka tohutohu1
Nga tikanga penapena me te ra paunga o te kete:
1. Kei te rongoa te kete i te 2 - 8 ℃.
2. Ko te waa whaimana he 12 marama.

Nga taputapu e tika ana:
Ko te ABI7500, ko te 9600 raupapa, ko te MJ opticon2, ko te Bio-Rad me etahi atu taputapu PCR rerenga nui e waatea ana.

Tikanga Whakamatau:
1. Tangohia te 1ml o te otinga whakarangatira ki roto i te ngongo centrifuge steril 1.5m1, centrifuge i te 10.000rpm mo te 5min, ka makahia atu te tipua; whakamahia te tikanga tangohanga phenol chloroform aronui ki te whakamatautau i te tauira kua tangohia, penapenahia ranei ki te 20C kia whakamatauria ra ano.
2. Whakanohia te otinga tauhohenga PCR ki te mahana o te ruuma kia taurite, tangohia te paru Taq i muri i te rewa, ka taapirihia te whiu Taq i te 2∪ / ngongo, ara, kua rite nga punaha urupare whakamatautau penei: PCR otinga urupare 22.5u1 + 0.4ulTaq whākōkī
3. Taapirihia te tauira: Me rewa te tangohanga waikawa ngota i -20 ° C i te temahana me te centrifuge i te 13,000 rpm mo te 5 meneti. Ko nga mana kino me te pai e rewa ana i te mahana o te ruuma i mua i te whakamahinga. I roto i ia ngongo tauhohe PCR, taapirihia kia 2 ul o te tauira tauira whakahaere kino ranei me te pai i tukatahia i te taahiraa 1, taupokina te ngongo, tuu ki runga i te taputapu PCR, ka tuhi i nga tauira tauira e hangai ana.
4. I runga-poari whakaniko me te waahi kitea: ko nga uruparenga 95C: 3min, 1 huringa; 95C: 5sec, 60C: 40sec (whiwhinga tohu), 40 huringa. I whakatauhia te punaha urupare ki te 25u1.
Mo te taputapu PCR fluorescence maha-hongere, kua tohua te tohu ki te Fam fluorescein.

Whakataunga hua:
Tena tirohia te pukapuka mo nga taipitopito.

Nga whakatupato mo te whakamahi i te kete:
1. Ka whakamahia noa tenei kete hei whakamatautau in vitro me nga kaupapa rangahau, tirohia koa nga tuhinga katoa o tenei pukapuka i mua i te tiimata ki te whakamahi.
2. Me tino wehewehe te whakamatau: te waahi whakarite-i mua i te PCR-whakarite i nga reagents whakamatautau; tauira waahanga tukatuka-hei whakamatautau i nga tauira, tukatuka tauira; kitenga-PCR whakarahinga, kitenga.
3. Mo nga paerewa whakahaere taiwhanga whaitake, tirohia te whakatinanatanga o nga paerewa whakahaere mo nga taiwhanga whakarei ira kua tukuna e nga mana whakahaere o te motu.

Mena kei te hiahia koe ki te mohio atu, toi mai ki a maatau

    Nga paatai ​​Trivia: Listeria monocytogenes

    Mo te listeria

    Whakamaramatanga Listeria

    Listeria he kitakita anaerobic aromahara hei matakite mo te listeriosis. Ko Listeria he huakita Gram-pai kei roto i te phylum pakitara-matotoru, i tapaina ki te ingoa ko Joseph Lister. Ko te nuinga o te whakamahi i te kai hei vector

    Ko Listeria he waahi i te taiao, ka kitea i te nuinga o nga kai. Ko te kai, te hēki, te heihei, te kaimoana, nga hua miraka, nga huawhenua, me era atu mea kua whakamatauhia kia mate a Listeria. Ma te paitini o Listeria monocytogenes e mate ai te toto me te kiko o te roro. He maha nga whenua kua kaha ki te whakahaere i nga monocytogenes Listeria ki nga kai me te whakatau i nga tikanga rite.

    Rauemi a Listeria

    I kitea tuatahitia a Listeria i te tau 1926 e tetahi kaiputaiao o Ingarangi no Awherika ki te Tonga i ahu mai a Murray i roto i te rapeti mate. Hei whakamaumaharatanga ki te papa o te pokanga whakaahurutanga hou, te tohunga tuuroro o Ingarangi a Joseph Lister (1827-1912), i te tau 1940, i tapaina ko Listeria monocytogenes i te 3 International Congress of Microbiology.

    Nga momo Listeria

    Ko nga monarchtogenes Listeria e mohiotia ana i te ao e whitu nga taumahatanga e whai ake nei:
    Listeria monocytogenes, Listeria mutans, Listeria innocolus, Listeria welsii, Listeria sileeri, Listeria monocytogenes, Listeria monocytogenes. I roto i era, ko L. monocytogenes anake te mea ka mate i nga mate o te tangata. Ko te tukumate o nga mate zoonotic. Ko te paitini kino ka mate te toto me te kiko o te roro. Ko te Listeria monocytogenes he mea whakapae na Listeria monocytogenes, he werewhare Gram-pai tera no te phylum pakitara matotoru.

    Mate Listeria

    I roto i te puninga Listeria, ko te Listeria monocytogenes anake ka mate i nga mate penei i te meningitis, te sepsis, te wairangi, me te mate neonatal ki nga tangata. Mena ka pangia e tetahi tangata tuuturu mate Listeria, he kino te mate, a, ko te tatauranga matemate tae atu ki te 33%.

    Nga tohu a Listeria

    Ko te mate Listeria ka pa atu ki te kirikaa, te mamae o te kakii, te ruaki, te korere ranei. Ko nga ahua uaua ka taea hoki te whakakii i te encephalitis me nga momo meningitis. Ko nga waahine hapu kei te tupono hoki ki te mate kirimana ki a Listeria. Ko nga wa hapu e 20 wa pea ka pangia e te mate a Listeria tena ki etahi atu. Ahakoa kaore he haputanga kaore he whanautanga hou, ka mate pea te whanau hou i tenei mate mai i te whanautanga, no reira he tino kaha te mate mo te mate.

    Listeria monocytogenes

    He aha nga listeria monocytogenes?

    Ko te Listeria monocytogenes he pathogen o nga mate zoonotic. Ka mate pea te listeriosis ki nga tangata me nga kararehe. I muri i te mate, ka puta ko te sepsis, te meningitis me nga pūtau mononuclear. Na te mea ko te kitakita he werau intracellular, ko te tangohanga a te kaitautoko i te nuinga o te mahi aukati aukati. Na reira, ko te listeriosis te nuinga kei roto i nga neonates, nga kaumatua, me nga taangata whaiwhaiwhai. Ko te Listeria monocytogenes e pangia ana e te paru, a ka uru ano ki te tinana na roto i nga karu ka pakaru te kiri me nga kiriuhi mucous kia mate ai.

    Tohatoha o Listeria monocytogenes

    Ko te Listeria monocytogenes e kitea whanuitia ana i roto i te taiao, ehara i te mea ngawari ki te whakatotoka me te rewa, ka taea hoki te aro ki te pehanga osmotic teitei. Kei roto te kitakita i te oneone, te mata o te mata, te waikeri, te waipiro, nga tipu, te silage, nga huawhenua pirau, kia ngawari ai te kai a te kararehe i te kitakita.

    Ko te ara whakawhiti o Listeria monocytogenes

    Ko te Listeria monocytogenes te nuinga e whakamahi ana i te kai hei kaihoko hopuhopu. Koinei tetahi o nga tino mate whakamataku e mau ana ki te kai, i mate ai te 20 ki te 30% o nga tangata pangia. He teitei ake te tatauranga matemate i tera o Salmonella me Botox. Ko te nuinga e kai ana i te tiihi maeneene, heihei iti kua wera, he kuri wera kaore ano i te wera, he miraka hou, he miraka whakatipu, he aihikiriimi, he paaka paraoa, he miihini reme, he huamata kāpeti, he herewi, he tomato, he parani French, he arero poaka hukapapa Na te aha. Tata ki te 80% -90% o nga keehi ka pa mai i nga kai poke.
    Ka uru te huakita ki roto i te tinana na roto i nga karu ka pakaru te kiri me nga kiriuhi mucous kia mate ai. Whai muri i te mate, ka pangia e te hunga hapu te kopu, te tamaiti hou ranei, ma te raanei, ma te waa whanau ranei. Ko nga huakita e noho ana i te tenetene me te pukupuku o te wahine ka mate pea i nga mate. Ko te taatai ​​puremu tetahi pea ka taea te tuku i nga mate, a kei te piki ake te ahua.

    Ma'i Listeria monocytogenes

    Nga tohu a Listeria monocytogenes

    Ahakoa te mauiui o Listeria monocytogenes i muri i te urunga ki te tinana o te tangata e pa ana ki te paitini o te kitakita me te tau me te mana aukati o te kaimanaaki, na te mea ko te kitakita he kitakita werau intracellular, ana ko te tangohanga a te kaitautoko i te nuinga o te mahi aarai aukati. . No reira, ko nga taangata ngawari he whanau hou, he wahine hapu me nga pakeke kua neke atu i te 40 nga tau. Hei taapiri, ko te hunga inu waipiro, ko nga tangata kua pakaru, kua ngoikore ranei nga punaha aarai mate, nga tuuroro e whiwhi ana i nga kaitohutohu whakaora me nga corticosteroids, me nga whakawhitinga okana ka pangia e te mate kitakita. Ko nga whakaaturanga haumanu o te tahumaero, ko nga taangata pakeke hauora he mate rewharewha-penei i te mate rewharewha, waahine hapu, mate turoro me te poto o te manawa, te ruaki, te hemorrhagic pura, te kokiri o te mate, te kirika, te wiriwiri, te koma, te materoto ohorere, te mate kiriuhi, Sepsis tae noa ki mate.

    Maimoatanga Listeria monocytogenes

    Penicillin, ampicillin, gentamicin, erythromycin, me etahi atu ka taea te whakamahi mo te whakaora i te mate a Listeria monocytogenes. Ko te Erythromycin me etahi atu paturopi whanui-whanui he mate ki te penicillin.

    Te aukati i te Listeria monocytogenes

    Ka ora te Listeria monocytogenes i te tukatuka wera noa, na te rongoa wera i patu te hapori kitakita whakataetae, kia ngawari te noho o Listeria monocytogenes i te korenga o nga tikanga whakataetae o te taiao, no reira ki te tukatuka kai, me eke te mahana matua ki te 70 ° C neke atu i te 2 meneti. Ko te Listeria monocytogenes he whanui i roto i te taiao, ahakoa kua wera rawa te kai me te tukatuka, kaore i te kaha te whakakakahu i nga monomettogenes Listeria, engari akene ka whakapoke i te hua o te hua, na, whai muri i te tunu kai, ka aukati i te Tuarua Tuarua he tino nui. Na te mea ka taea tonu e te Listeria monocytogenes te whakatipu me te whakaputa uri i te 4 ° C, na te kai pouaka kore wera kaore i wera ka mate te mate o te kai, me whakawera te kai o te pouaka whakamātao i mua i te kohi.

    Whakamatautau Listeria monocytogenes

    1. Tikanga ahurea kitakita

    Ko te tikanga whakamātautau tuku iho mo Listeria i roto i te kai ko te kawe i te whakarangatiratanga i mua i te whakarangatira whiriwhiri ranei, me te whakamahi i nga koroni hihiko wehe me te whakatipu mo nga whakamatautau urupare koiora, whakamatautau hemolysis, me nga whakamatautau hemolysis mahi tahi (CAM P). I muri mai i te Listeria monocytogenes he serotyped ano. Ko te whakarangatira me te whakarangatira whiriwhiri he mea tino nui ki tenei tikanga. Ko nga tikanga whakarangatira ko te: tikanga whakarangatira makariri me te tikanga maatanga mahana. Ko te tikanga whakarangatira makariri ka waihangahia i te 4 ° C mo nga ra 30, i etahi waa tae atu ki te tau kotahi. I te pāmahana rūma, me whakatipu te huakita 24h ki te 7d. Na reira, ko te tikanga rapunga tuku iho e hiahiatia ana kia 7-11 nga ra ki te wehe me te tautuhi i nga monocytogenes Listeria, no reira he roa te wa rapu tikanga tuku iho.

    2. Te whakahiato serum

    E ai ki nga antigens kitakita me nga antigens flagellar, kua wehea te LM ki nga momo 16: 1 / 2a, 1 / 2b, 1 / 2c, 3a, 3b, 3c, 4a, 4ab, 4b, 4c, 4d, 4e, 5, 6a, 6b , 7. Ko te hanganga antigen kaore he aha ki te poke. Ko nga mea tino nui o te tangata ko nga serotypes 1 / 2a, 1 / 2b, me te 4b, e tata ana ki te 90% o nga keehi o te ao i tenei mate.

    3. Nga tikanga whakamatau koiora koiora

    3 .1 Hangarau hangarau rapu
    Ko tenei hangarau te rauropi koiora tuatahi i whakamahia mo te kitenga o Listeria
    Ako hangarau. I te timatanga o te 1988, Atin et al. i whakaraupapahia ka whakaraupapahia he waahanga 500bp DNA o te reanga Listeria beta-hemolysin, a i whakahiatohia e wha nga waahanga oligonucleotide mai i tenei raupapa, tapaina te uiui me te 32P, ka mahi i tetahi whakamatautau whakamoatanga ira I whakapumautia ko te tirotiro anake i urupare ki a Listeria monocytogenes, a i kino ki etahi atu momo o Listeria me nga momo kitakita-kore, e whakaatu ana i te tino kiko.

    3.2 Te hangarau kitenga o te mekameka Polymerase (PCR)
    Ko te whanaketanga o te PCR he tino paari, a he whanui te whakamahi i te kitenga o Listeria. Ko te PCR whakarahi ake i nga tiimatanga motuhake kua hoahoahia mai i runga i te raupapa ira motuhake o te Listeria monocytogenes, a ko tetahi e hangai ana ki te waahanga motuhake o te genome o Listeria monocytogenes. Ko nga raupapa e whaaia ana ko nga momo wairangi penei i te hly A, iap, inl, Dth-18. Ko te painga ki te whakamahi i te tikanga PCR kia kitea a Listeria ko te motuhake o te tikanga, engari ko te ngoikoretanga ko te ngoikoretanga iti; ka whakanuihia te ahurea tauira i muri i te tangohanga o te matū, hei whakapai ake i te tere kitenga o te tauira; a ka taea E te "ora, kore-ngaki" Listeria monocytogenes kaore i kitea e nga tikanga whakarangatira tuku iho.

    Whakairinga tata

    © manatārua 2020 - BALLYA rahuitia
    envelopwaea-pukorotohu-mahere LinkedIn facebook Pinterest youtube rss twitter Instagram facebook-pātea rss-pātea hono-pātea Pinterest youtube twitter Instagram