E coli fluorescence whakamātautau PCR wā-tūturu

Salmonella

Te wa-roa PCR fluorescent i te kitenga vitro o te E coli.

Whakatakotoranga: 96 T / pouaka
Kei te rongoa te kete i te 2 - 8 ℃.
Ko te waa whaimana he 12 marama.
Whakapūtātanga: 96 T / pouaka

Whakamahinga: Te wa-roa PCR fluorescent i te kitenga vitro o e coli.

Te kaupapa rapu: Kei roto i te kete nga timatanga e-coli motuhake. Mena kei roto i te tauira te e coli, ko te e coli DNA i tangohia i muri o te whakarangatiratanga i mua ka whakarahihia e PCR. I te wa o te uruparenga, ka whakawairihia te uiui rewharewha e-coli me te waikawa waikawa uho, me te waatea Taq whākōkī Hydrolysis ki te wehe i te roopu fluorescent mai i te roopu tinei i runga i te tirotirohanga: kia taea ai te whakatau i te aroaro o te e coli i te wa tonu na Tuhinga o mua.

Hua me te hanganga:
Tito (96T / kete)WhakapūtātangaRahinga
Rongoā tangohanga DNA3ml1 ngongo
E coli PCR otinga tauhohenga1100ul1 ngongo
Paoa whākōkī (5U / ul)20ul1 ngongo
E te mana whakahaere pai40ul1 ngongo
E coli Whakahaere Kino0.5ml1 ngongo
Pukapuka tohutohu1
Nga tikanga penapena me te ra paunga o te kete:
1. Kei te rongoa te kete i te 2 - 8 ℃.
2. Ko te waa whaimana he 12 marama.

Nga taputapu e tika ana:
Ko te ABI7500, ko te 9600 raupapa, ko te MJ opticon2, ko te Bio-Rad me etahi atu taputapu PCR rerenga nui e waatea ana.

Tikanga Whakamatau:
1. Tangohia te 1ml o te otinga whakarangatira ki roto i te ngongo centrifuge steril 1.5m1, centrifuge i te 10.000rpm mo te 5min, ka makahia atu te tipua; whakamahia te tikanga tangohanga phenol chloroform aronui ki te whakamatautau i te tauira kua tangohia, penapenahia ranei ki te 20C kia whakamatauria ra ano.
2. Whakanohia te otinga tauhohenga PCR ki te mahana o te ruuma kia taurite, tangohia te paru Taq i muri i te rewa, ka taapirihia te whiu Taq i te 2∪ / ngongo, ara, kua rite nga punaha urupare whakamatautau penei: PCR otinga urupare 22.5u1 + 0.4ulTaq whākōkī
3. Taapirihia te tauira: Me rewa te tangohanga waikawa ngota i -20 ° C i te temahana me te centrifuge i te 13,000 rpm mo te 5 meneti. Ko nga mana kino me te pai e rewa ana i te mahana o te ruuma i mua i te whakamahinga. I roto i ia ngongo tauhohe PCR, taapirihia kia 2 ul o te tauira tauira whakahaere kino ranei me te pai i tukatahia i te taahiraa 1, taupokina te ngongo, tuu ki runga i te taputapu PCR, ka tuhi i nga tauira tauira e hangai ana.
4. I runga-poari whakaniko me te waahi kitea: ko nga uruparenga 95C: 3min, 1 huringa; 95C: 5sec, 60C: 40sec (whiwhinga tohu), 40 huringa. I whakatauhia te punaha urupare ki te 25u1.
Mo te taputapu PCR fluorescence maha-hongere, kua tohua te tohu ki te Fam fluorescein.

Whakataunga hua:
Tena tirohia te pukapuka mo nga taipitopito.

Nga whakatupato mo te whakamahi i te kete:
1. Ka whakamahia noa tenei kete hei whakamatautau in vitro me nga kaupapa rangahau, tirohia koa nga tuhinga katoa o tenei pukapuka i mua i te tiimata ki te whakamahi.
2. Me tino wehewehe te whakamatau: te waahi whakarite-i mua i te PCR-whakarite i nga reagents whakamatautau; tauira waahanga tukatuka-hei whakamatautau i nga tauira, tukatuka tauira; kitenga-PCR whakarahinga, kitenga.
3. Mo nga paerewa whakahaere taiwhanga whaitake, tirohia te whakatinanatanga o nga paerewa whakahaere mo nga taiwhanga whakarei ira kua tukuna e nga mana whakahaere o te motu.

Mena kei te hiahia koe ki te mohio atu, toi mai ki a maatau

    Nga patai Trivia: E coli

    Mo e coli

    E coli, e mohiotia ana ko Escherichia coli, i kitea e Escherich i te tau 1885. Ko te Escherichia coli he huakita pathogenic takirua. I raro i etahi ahuatanga, ka pangia e te mate gastrointestinal te mate uruta ranei o nga momo kakano me nga okana o te tangata me nga momo kararehe.

    E coli te rahi

    Ko te rahinga he 0.5 × 1 ~ 3 miihini. Chow flagella, ka taea te neke kaore he mokowhiti. Ka taea te kohi i nga momo momo huka hei whakaputa waikawa me te hinu. He kitakita noho noa i nga whekau o te tangata me te kararehe. Ka uru ki nga whekau me nga kohungahunga i muri i te whanautanga, ka haere tahi nga taangata mo te koiora, tata ki te 1/3 o te taumaha maroke o te paru.

    E ahua coli

    Ko te E coli ko te Brevibacterium, he kiko porotaka nga pito, he kino te Gram. I etahi wa, na te rereketanga o nga taiao, he rite te ahua o te porowhita, he haea ranei te ahua o nga ruma takitahi. Ko te E. coli te nuinga he takitahi, e rua ranei, engari kaore e whakaritehia kia pai te mekameka. ko te nuinga o nga taumahatanga E. coli he kapurapu, he hangahanga microcapsules ranei, engari kaore e taea te hanga pungawerewere; ko te nuinga o nga taumahatanga E. coli ka tipu te fimbriae, ko etahi ko te fimbriae motuhake e haangai ana ki te kaimanaaki me etahi atu kakano, sela ranei.

    E whakarōpūtanga coli

    Te painga Pathogenic
    I tenei wa, ko te whakarōpūtanga o te ao e ono nga momo E. coli, ara ko te E. coli (EPEC), ko te E. E coli (EIEC), hemorrhagic usus E coli (EHEC), kohinga ngongo E coli (EAEC) me te paitini peepi Shiga-rite te paitini i kitea i enei tau kua pa mai etahi E coli (ESIES) he urethral UPEC) ka mate pea te mate mimi, me te kaitautoko hou o te puku E. E. coli (EAggEC)

    Te hemohiko
    E ai ki te kaha o E. coli ki te whakaputa i te hemolysin me te kaha ki te whakaheke toto, ka taea te wehe a E. coli kia rua nga waahanga: hemolytic E. coli me te kore-hemolytic E. coli.

    Enterotoxigenic
    E ai ki te kaha o te E coli ki te whakaputa i te enterotoxin i te wa e pangia ana te mate, ka taea te wehewehe i te E coli ki nga waahanga e rua: enterotoxigenic E coli me te kore-entotoxinogenic E. coli. Ko te Enterotoxigenic E. coli he tino mate mo te koretake o te mate korere o te tangata me nga momo kararehe. Ko te tautuhi i te enterotoxigenic E. coli ko te nuinga ki te whakatau i te momo o te enterotoxin kua huna e te E. coli wehe. Hei taapiri, kia rite ki te kaha o E. coli ki te whakaputa i te enterotoxin, me te mohio ki nga momo enterotoxin, ka taea te whakariterite i te E coli hei momo enterotoxin.

    E coli mate

    Ko te E. coli he huakita noho noa i nga whekau o nga kararehe, a ko tetahi waahanga iti ka pa he mate i raro i etahi ahuatanga. Ko nga serotypes o E. coli ka pangia e te mate puku o te tangata, o te kararehe ranei, ko te nuinga na nga antigens fimbria motuhake, nga paitini pathogenic me etahi atu mate. Hei taapiri atu ki nga mate puku o te puku, ka taea ano e ratau te mate urinary tract, te rumati, me te meninges. Te mumura me te mate septic.
    Kei roto i te Escherichia coli te maha o nga roopu kitakita me te rerekee o te mate. Ko nga mate o te tangata E. coli ka tohatohahia kia rua nga momo: nga mate pukupuku me nga mate taapiri.

    E tohu coli

    Ko te tohu tino mate o te mate puku ko te mate korere. Mena he nui te mate, ka pa te ru, ka heke te toto, ka nui haere te ngakau. Mena he mate puku, he whakapairuaki, ruaki, mate kirika, auau mimi, me te akiaki i muri o te mate E. coli.

    E coli tukumate

    I te nuinga o te waa, ka wehea a E. coli ki nga roopu kitakita e wha e ai ki ta te pathogenicity ki te tangata: common E. coli, enteropathogenic E. coli, enterotoxigenic E. coli, and invasive E. coli. Ko nga mea e toru ko te huakita pathogenic e mate ai te korere.

    E coli pathogenesis

    Kei ia flora etahi momo serotypes. Enterotoxigenic Escherichia coli ka taea te whakaputa i te enterotoxin wera-aukati me te enterotoxin wera-aukati. Ko te mahinga o enei enterotoxins e rua e whakahaerehia ana e nga plasmids. Ko te plasmid he momo DNA kore-chromosomal e ngawari ana te whakawhiti. Ma te whakawhiti tahi i nga plasmids ka taea te kaha o te mahi-kore-ngau kia whiwhi i te kaha whakaputa-paitini. Na te tukunga mai o te plasmid, ka taea e Escherichia coli o tetahi serotype te whakaputa i te enterotoxin me te koroni, na reira ka puta ke te mate.

    E maimoatanga coli

    Tuatahi, ki te kore e tino nui nga tohu o te mate, ka ngawari te mate pukupuku me te mamae o te kopu, ka taea e te whakahaere waha o te bifidobacteria te whakapai ake i te koretake o te puku me te whakahaere i nga mate microflora o te puku.
    Mena he nui te mamae o te kopu me te mate koretake, kei reira hoki te tuuwai waipiro, whakaarohia kia tukuna he rongoa anti-mumura penei i nga paturopi quinolone berberine ranei, me te whakakapi wai hei whakakaha ake i nga tohu maroke.

    No whea te e coli

    Ko te Escherichia coli tetahi o nga microorganism e tino kitea ana, e tohaina whanuitia ana te nuinga, ko te nuinga kaore i te mate pathogenic, ko te nuinga o te paru kei roto i nga whekau o te tangata, o te kararehe ranei, ka kiia ko "flora noa" na te tangata.

    E coli tuku

    Ko te maakete nui o te mate o te tangata E. coli mate ko te maha o nga mate E. coli e tukuna ana i roto i nga paru o nga tuuroro mate puku. Ko te ara whakawhiti o E. coli i waenga i nga taangata ko te nuinga na te ara whakawhiti-waha-waha, na reira ka horapa te mate kino ranei o te mate E. coli i raro i etahi ahuatanga.

    Enterobacter sakazakii i roto i te paura tamaiti tikanga

    Ko te Enterobacter sakazakii he mea hanga i te taiao e kitea ana i nga waahi me nga waahi kaainga e whakaputaina ai te momo kohungahunga. Ahakoa ko te tauira o te kohungahunga ehara i te hua horomata, ka poke pea ki nga mate tukemate e mate ai nga mate kino, mena ka aata rite te rongoa o te kohungahunga me te penapena, ka taea te whakaheke i te tuponotanga o te mate na Enterobacter sakazakii. Kia pai ai te whakarite i te taatutanga kohungahunga, me horoi e koe i nga wa katoa nga taputapu kai me te whakarite.

    E aukati coli

    1. Kia noho ma te waahi bai me nga taputapu o te kaini, kia tika te tuku para.
    2. Kia ma o ringa ka whakapai i o whao i nga wa katoa.
    3. Horoia o ringaringa ki te hopi me te wai i mua i te kai, te whakahaere kai ranei. Me horoi ano hoki o ringa i muri i te whakamahinga i te wharepaku, ki te huri ranei i nga kope.
    4. Me whakamahi te wai tap ki te wai inu, a ko te mea pai me kohuatia i mua i te inu.
    5. Me hoko mai he kai hou mai i te waahi pono, kaua hei tautoko i nga kaihaehae kore raihana.
    6. Aukati i te kai i nga kai morearea morearea, penei i te miraka kaore ano kia tukatukahia e te haamahana-iti o te pāmahana, me nga paina parakihi tunu kai, nga pipi o te whenua, me etahi atu kai kai.
    7. Ka tunu kai ana, kakahuria te apron ma, hei horoi me te potae.
    8. Me horoi rawa nga kai.
    9. Ko te kai pirau me hipoki ki te taupoki ka waiho ki roto i te pouaka whakamātao.
    10. Ko nga kai mata me nga kai maoa, ina koa ko te toka kau me te kau, me aata wehe me penapena (penapena nga kai maoa ki runga ake o te pouaka whakamātao me nga kai mata o raro) kia kore ai e poke.
    11. Me horoi te pouaka whakamātao ka rewa i nga wa katoa, me pupuri te paemahana ki te 4 degrees Celsius ki raro ranei.
    12. Mena ka wera nga waahanga katoa o te kai ki te 75 degrees Celsius, E. coli O157: Ka taea te whakakore i te H7; no reira, me tunu rawa te koikoi paraoa me te steak hamburger ki te 75 nga nekehanga Celsius mo te 2 ki te 3 meneti, kia tahuri ra ano te kiko kua tunua He parauri, ka marama te kawa.
    13. Kaua e hapai i nga kai maoa me nga ringaringa; ki te tika, kakahuria he karapu.
    14. Me pau wawe i te kai i muri i te tunu kai.
    15. Mena e tika ana kia waiho nga toenga o nga kai maoa, me whakamahere ki te pouaka whakamātao me kai wawe tonu. Whakanuihia i mua i te kai. Ko nga kai maru me panga atu.

    Whakamatau mo e coli

    Tikanga whakarakei

    Ko tenei tikanga ko te tikanga mo te maara o E. coli i runga i tetahi kaupapa i te 44.5 ° C, kei roto nei he kohinga hukahuka me 24 haora te maara. Ko nga mahi matua ko te whakatipu, ko te ahurea wehe, ko te whakaterenga tuarua, ko te karuiti kitenga, me etahi atu.

    Matrix-awhina laser desorption ionization wa-o-rere papatipu spectrometry papatipu

    Matrix-assist laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MAL-DITOF-MS) tikanga ko te whakaranu i te tauira hei mehua ki te otinga kopu i tetahi waahanga, me te whakamahi i te whakaoho taiaho ngongo hei whakaohooho i te kopu, na te polymer ki te whakaputa katote ngota ngota ngota me te ngota katote polymerization Kei te tere te tinana ka kitea i roto i te wehenga-papatipu papatipu-a-rererangi. I te mutunga, ka wehea te polymer inea kia rite ki te tau papatipu, i tukatukahia kia hangaia he papatipu papatipu, me te wetewete me te whakataurite ma te raupaparorohiko hei tirotiro me te whakatau i te tuumomo (tapumati) hihinga kia tutuki te rereketanga me te tautuhi i nga momo momo microorganism kua whakaritea ranei.

    Tikanga peepi Immunomagnetic

    Ko te kaupapa matua o te hangarau wehenga ko te whakamahi i nga peara aukume hei kaikawe me te rauropi hei whakakotahi i te antibody me nga peara aukume, katahi ka oti te nekehanga miihini ma te hangarau aukume hei wehe i a E. coli. Ka whakatauritea ki etahi atu huarahi wehewehe i te kitakita, he tino painga tenei tikanga. Ka taea e tenei hangarau te whakapai ake i te kitenga angitu o te pathogenic Vibrio i roto i nga tauira, a ka taea e te hangarau pirepire immunomagnetic te hamani i nga momo koiora rereke i roto i nga momo momo kitakita. , Ana ki te rahinga whakapai ake i te whai huatanga kitenga.

    Whakamatau taputapu aunoa

    Ko te whakamahinga matua o te kaitohu aunoa aukati, i hangaia tenei hangarau me te whakamahia i te tau 1970. Na te whanaketanga me te ahunga whakamua o te putaiao me te hangarau, ka whakamahia whanui te hangarau taputapu taputapu aunoa, a he tino watea ki te whakahaere, ka taea te whakaora i te wa roa. , he iti te tohu o te pokanoa, ka taea te whakaora i te tangata me te whakauru rauemi, ka taea hoki te whakapai ake i te tika o te kitenga. I roto i nga mahi whanaketanga o naianei, he tino whanui te whakamahinga o te punaha immunoassay whākōkī aunoa.

    Koiora ATP

    I roto i nga mahi whanaketanga i roto i enei tau kua taha ake nei, e whakamahia whanui ana te hangarau koiora koiora, he hangarau tere hoki mo te kimi i nga rauropi. I roto i nga pūtau hohe, ko te ATP te hua pūkaha kaha o te pūngao, ka taea te whakarato i te pūngao e hiahiatia ana i roto i ngā mahi a-tinana o ngā pūtau. Ana, ka taea e tenei hangarau te pupuri i tetahi ihirangi i roto i te whānuitanga o te tinana ora. Ko te hangarau kitenga o Escherichia coli i roto i te kai ka taea te whakamahi i te tikanga mo te whakaahua i te fluorescence Photometry, na te mea ko te take e whakaputa ana te rauropi i te maarama ko te mahi o te luciferase, e hua ana i te putanga o te putanga o te marama. Ko te matū e ahu mai ana i nga muraahi i Amerika ki te Raki, a ka taea te ngongo i te haumanutanga o te fluorescein. Heoi, kaore e pumau te matū, ka tere te whakaheke i te kiri. Hei taapiri, ko te hangarau hopu hua hua hopu he tino tere, a he ngawari te kawe o te taputapu, he pai mo te kitenga i te papa-waahi.

    Whakairinga tata

    © manatārua 2020 - BALLYA rahuitia
    envelopwaea-pukorotohu-mahere LinkedIn facebook Pinterest youtube rss twitter Instagram facebook-pātea rss-pātea hono-pātea Pinterest youtube twitter Instagram