Quick Navigation
Inona ny immunochromatography?
Ny fitsipiky ny immunochromatography
Ny fomba fanandramana mahazatra amin'ny immunochromatography
Ireo sombin-loko miloko ampiasaina amin'ny immunochromatography
Inona no atao hoe koloidal volamena?
Ny fomba fanombanana karazana 3 miorina amin'ny immunochromatography volamena koloza
Ireo akora ampiasaina amin'ny fampandrosoana immunochromatography
Ireo fitaovana ampiasaina amin'ny fampandrosoana immunochromatography
Ny fomba famokarana amin'ny fampandrosoana immunochromatography
Ahoana ny fampiasana immunochromatography volamena kôlôdialy mba hahitana ny fiarovana ny sakafo?
Famaranana
Immunochromatography (immu-nochromatography assay, ICA) dia karazana fomba immunoassay vaovao izay niseho tamin'ny fiandohan'ny taona 1980. Izy io dia immunoassay tsotra sy haingana napetraka amin'ny fototry ny immunofiltration (IFA).
Ny fitsipiky ny immunochromatography dia ny fametrahana antibody manokana amin'ny faritra iray amin'ny vatana membrane nitrocellulose. Rehefa atsoboka ao anaty santionany ny fiafaran'ny nitrocellulose maina (analyte), noho ny hetsika kapilara, ny santionany dia handroso miaraka amin'ny membrane, rehefa mifindra any amin'ny faritra misy ny antibody, ny antigène mifanaraka amin'ny santionany dia mifatotra manokana amin'ny antibody. . Raha voaloto amin'ny immunogold na immunoenzyme, dia afaka mampiseho tarika miloko ilay faritra mba hahazoana immunodiagnosis manokana.
Ny teknolojia RIA dia mampiasa antigène na antibodies misy marika isotop radioaktifa (toy ny 125I, zhi32P, 3H, sns.) Handrefesana ny radioactivity-ays-ray na β-taratra miaraka amina detector-γdao-ray na counter scintillation ranon-tsika hamaritana ireo antivirus na antigen volume teknolojia. Izy io dia misy radioimmunoassay miavaka amin'ny marika antigen sy immunoradiometric assay (IRMA) miavaka amin'ny antibody misy marika. Ilay teo aloha dia mampiasa ny fomba fifamatorana mifamatotra, izay mandrefy ny antigène macromolecular sy ny antigène molekiola kely; ity farany dia mampiasa fomba mivaingana mba handrefesana ireo antigène macromolecular.
Ny RIA dia manana ampahany betsaka amin'ny fomba immunoassay famonoana bibikely tany am-boalohany, ary nanangana ny taratra dieldrin, aldrin, 2,4-D ary 2,4,5-T, parathion ary paraquat. Immunoassay. Na dia marefo aza ity fomba ity (matetika ny RIA dia 10-9g, 10-12g, na 10-15g aza) ary manana fampiharana marobe, takelaka lafo vidy no ilaina hanatanterahana RIA, ary misy ihany koa ny olana toy ny taratra sy ny loto . Ny fampiharana sy ny fampandrosoana ny sehatry ny fikarohana dia iharan'ny famerana sasany, ary soloina tsikelikely amin'ny fomba immunoassay hafa.
EIA dia teknolojia immunoassay novolavolaina taorian'ny RIA. Ny fitsipiky ny detection dia mitovy amin'ny an'ny radioimmunoassay, fa ny marika ampiasaina dia anzima, izay manambatra ny fomba fiasan'ny hery fiarovan'ny antigène sy ny antiôdrafia miaraka amin'ny catalysis misy anzima tena mahomby. Ny asan'ny anzima mifatotra amin'ny dingana mafy orina dia refesina mba hamaritana ny refesina ny habetsaky ny akora. Ny anzima ampiasaina ho marika dia misy peroxidase horseradish (HRP) sy phalphasease alkaline (AKP), glucose oxidase (GO), urease (urease) sns.
Ny fanohanana mafy ny valin'ny valin'ny anzima dia misy fantsona plastika polystyrene sy fonosana. Amin'izao fotoana izao, ny ankamaroan'ny takelaka microtiter 96-well (MTP) dia ampiasaina ho fanohanana mafy. Ity karazana takelaka ity dia manana fahaiza-mamantatra betsaka sy santionany maro, ary mpamaky microplate tsotra ihany no afaka mahazo angon-drakitra fitiliana marina. Ny manam-pahaizana sasany koa dia mampiasa vakana andriamby ho fitaovana mateza amin'ny fikarohana EIA. Ny fitsipika dia ny famonosana fitaovana polymer (polystyrene, polyvinyl chloride, sns.) Eo ivelan'ny poti-by kely (Fe2O3, Fe3O4), ary avy eo mifamatotra amina vondrona amino. (-NH2), carboxyl (-COOH), hydroxyl (-OH) ary ireo vondrona miasa hafa dia ampiarahina amin'ny antibodies na antigén mba hanaovana vakana mahazaka. Ny tombony azon'io fomba io dia ny microbeads manana velarana lehibe manokana, fahaizan'ny adsorption matanjaka, ary azo ajanona amin'ny dingan-drakitra mba hisamborana haingana ilay mpanadihady ao amin'ilay santionany. Aorian'ny fampiharana ny sahan'andriamby, ny microbeads dia azo sarahina amin'ny vahaolana santionany, amin'izay hampihena ny fitiliana. Fotoana, manatsara ny fahatsapana ny detection.
Satria mora miomana, milamina ary tsy lafo ny reagents misy marika anzima, ary ny fahatsapana ny immunoassay anzima dia manakaiky ny teknolojia radioimmune, ny teknolojia EIA dia nivoatra haingana tato ho ato, ary karazana fomba EIA novolavolaina. Anisan'ireny ny fitsapana fiarovana ny hery fiarovana (enzim-pandrindrana enzimanta, ELISA) amin'izao fotoana izao no teknika immunoassay anzima be mpampiasa indrindra amin'ny fikarohana ny residue famonoana bibikely.
Ny fotokevitra fototry ny fitiliana FIA dia ny fampifangaroana voajanahary ny antigens sy ny antibodies avo lenta amin'ny fandrefesana ny fluorescence, ary ny fampiasana fluorescent ho toy ny mpanentana hametahana anarana antibodies, antigens na molekiola hapten hanomanana reagents fluorescent manokana. Rehefa entin'ny hazavan'ny ultraviolet na ny jiro manga ny singa fluorescent ao amin'ny conjugate antigen-antibody, dia afaka mandray angovo maivana izy ary miditra amin'ny fanjakana mientanentana. Rehefa miverina amin'ny tany ambany avy amin'ny fanjakana mientanentana izy dia afaka mamoaka ny angovo azo tsofina amin'ny endrika taratra electromagnetic, ka miteraka fluorescence. Ny famolavolana ny fihenan'ny pesticide-fluorescence intensity dia afaka mamantatra am-pahalalana an-tsary sy an-jotra ny reside famonoana bibikely ao anaty santionany.
Fluorescein mety amin'ny fametahana marika ny antibodies, antigens na molekiola hapten dia tsy maintsy mahafeno ny fepetra takiana:
LCIA dia azo zaraina ho immunoassay chemiluminescent (immunoassay chemiluminescent, CLCIA) ary immunoassay bio-luminescent (immunoassay bio-luminescent, BLCIA).
Tao amin'ny 1976, Shroeder dia nanangana teknolojia immunoassay homogeneous voalohany mampiasa rafitra biotin (B) -avidin (A). Taorian'izay, Halman sy Velan dia nanitatra izany tamin'ny rafitra heterogeneous, izay efa tafiditra anaty fikarohana biolojika. Saha isan-karazany. Ny fitsipika dia ny manondro ny fitambaran'ny antigen sy antibody amin'ny luminescence. Rehefa ampiarahina amin'ny antibody na antigen mifanitsy aminy ny mari-pamantarana luminecent, dia mihetsika miaraka amin'ny anzima ny substrate, na ny fihenan'ny redox miaraka amin'ny agents luminescent, na ny fluorescent (toy ny rubrene, sns.) Mampientanentana sy mamoaka angovo maivana. Farany, ny hamafin'ny hazavana dia norefesina tamin'ny fotometera ho famakafakana be loatra. Ny marika famantarana ny luminecent dia horseradish peroxidase (HRP), luminol (luminol), isoluminol (isoluminol), lophine (lophine), lucigen (lucigen), double (2, 4, 6) -Trichlorobenzene) oxalate, biphenyltriol ary 6 [N- (4-diaminobutyl) -N-ethyl] -amino-2,3-dihydrophenazine-1,4-dione (ABEI) sns. Raha ny antibody (na antigen) misy marika miaraka amin'ilay marika famantarana luminescent voalaza etsy ambony dia ampifandraisina amin'ny antigen mifanentana (na antibody) ao anaty vahaolana buffer pH sasany, dia hamoaka hazavana eo ambanin'ny asan'ny singa miasa (toy ny H2O2, sns.), ary ny hamafin'ny famirapiratany dia hitovy amin'ny an'ny entona andrana. Mifanitsy amin'ny fifantohana izy io, noho izany dia azo ampiasaina amin'ny famakafakana be loatra.
Luminescence immunoassay dia manana tombony amin'ny famaritana mahery vaika, fahatsapana avo (fetra famaritana 10-15mol / L), haingam-pandeha (1 ～ 3h), ary fahazoana mora fitaovana luminescent. Na izany aza, ny fizotran'ny luminescence sy ny hamafiny dia matetika voakasiky ny firafitry ny akora simika amin'ny luminecent tena, ny pH an'ny salantsalany, ny vovonan'ny mpiara-mamirapiratra ary ny loto anaty vy.
Ny fitsipiky ny detection GICA dia ny palitao ny ligands (antibodies na antigens) amin'ny membrane microporous toy ny fonosana nitrocellulose amin'ny endrika linear. Ny marika volamena kôlôdialy dia raikitra koa amin'ny ligand na zavatra hafa amin'ny toerana maina amin'ny fitaovana mpitroka. Ny hetsika capillary dia mahatonga ny vahaolana santionany milomano amin'ny tsipika chromatographic. Rehefa milomano amin'ny marika volamena kôlôdialy izy, raha misy ny receptor hosedraina ny santionany, ny dingana voalohany dia valinteny miaro tena manokana mba hamoronana hery fiarovan'ny hery fiarovan-tena Rehefa mitohy milomano mankamin'ny faritra misarona, ny dingana faharoa misy ny valiny manokana, ary ny hery fiarovana voaforona dia voafandrika ao amin'ilay faritra mifono mifono, ary ny tarika mena dia asehon'ny volamena misy kôlôdaly (detection Band), raha ny marika malalaka kosa dia miampita ny tarika detection ary misaraka avy hatrany amin'ilay marika voafatotra. . Ny famaritana kalitao na habetsahana dia azo atao amin'ny alàlan'ny fikarohana ny fisian na tsy fisian'ny loko na ny aloky ny loko amin'ny fehikibo2.
Ny fomba GICA dia manana tombony amin'ny haingana (5-20min), vokatra mora, mazava, tsy misy fahaiza-miasa sy fitaovana manokana sarotra ary mora entina. Na izany aza, raha ampitahaina amin'ny fomba immunoassay hafa, ny fahatsapana ity fomba ity dia somary ambany kokoa, ary mety indrindra amin'ny famaritana qualitative haingana na semi-quantitative haingana. Amin'izao fotoana izao, io fomba io dia nampiasaina tamin'ny sehatry ny fikarohana maro toy ny fitsaboana sy ny biolojia, ary efa be mpampiasa indrindra any amin'ny firenena mandroso.
Ny fampiasana teknikan'ny IA tokana handinihana ny residu pestiside dia tsy dia misy fampahalalana firy, ary ny fisafidianana ny fomba famakafakana ara-batana sy simika dia somary mahantra. Kramer et al. nampiasa immunoassays sy chromatography ranon-javatra (LC) miaraka, izay manamora ny fomba famakafakana sy manatsara ny fahombiazan'ny detection. Ny fitambaran'ny LC-IA dia manambatra ny fahafahan'ny fisarahana avo amin'ny LC miaraka amin'ny fahatsapana avo sy ny maha-manokana an'i IA. Ity fomba famakafakana ity dia mety indrindra amin'ny famakafakana residue marobe sy microanalysis. Ny fitambaran'ny chromatography immunoassay sy ny gazy na ny spectrometry faobe (GC na MS) dia mety hampihena ny fihenan-tsofina amin'ny famakafakana fanafody famonoana bibikely na metabolite miaraka amina rafitra mitovy amin'izany mba hampihenana ny zavatra tsy marina.
Nanoparticle volamena koloidal
Sombiny tara
Sombitry ny karbaona
Vakana andriamby
Loko mena
Teboka Quantum
Fivoarana ambony ambany
Colloidal volamena, fantatra ihany koa amin'ny hoe nanoparticle volamena, dia fampiatoana, fanamiana ary fampielezana zana-kazo volamena mihantona ao anaty ranoka aorian'ny fihenan'ny sira volamena ho volamena. Ny sombintsombin'ny volamena dia misy atôma volamena sy sosona ion-droa manodidina azy.
Ny lokon'ny vahaolana dia miankina amin'ny lokon'ny akora miparitaka, ny fanaparitahana ny fitaovana miparitaka ary ny karazana hazavana misy, na hazavana miparitaka na hazavana ampitaina. Arakaraka ny maha kely ny sombintsombiny ary avo kokoa ny fanaparitahana dia ny halavan'ny halavan'ny hazavana miparitaka. Ho an'ny hydrosol misy akora iray hafa dia hafa ny haben'ny sombiny, ary hafa ihany koa ny lokony.
Ohatra, ny sombintsombin'ny volamena kôlôdera dia eo anelanelan'ny 5-20 nm, ny halavan'ny ondran'ny 520 nm, dia loko mena; ny habe eo anelanelan'ny 20-40 nm mazàna dia mitroka ny jiro maitso amin'ny halavan'ny 530 nm, ary mena mainty ny vahaolana; ny poti-bolan'ny koloidra 60 nm mifoka indrindra ny halavan'ny volom-boasary 600 nm, ny vahaolana dia manga-volomparasy. Ny sombin-kôlôla kôlôlaia izay matetika ampiasaina amin'ny immunohistochemistry dia eo amin'ny 5-60 nm, ary mena ny vahaolana.
Ny sombina miloko malaza indrindra dia ny nanoparticle volamena. Teknolojika volamena kôlôdialy izay manambatra ny valin'ny hery fiarovan'ny antigen-antibody sy ny teknolojia fanoratana volamena koloidaly ho an'ny famaritana kalitao sy habetsahan'ny antigen sy antikôdrafika. Noho ny tombony ananany toy ny haingam-pandeha, ny fahatsorana, ny vidiny ambany ary ny fitoniana tsara, ny fikarohana volamena koloidaly dia be mpampiasa amin'ny sehatry ny fikarohana klinika.
Amin'izao fotoana izao, ny fomba fitadiavana fampiasa matetika amin'ny sehatra fitadiavana volamena koloidialy dia misy ny fomba sandwich misy antibody roa, ny fomba fifaninanana ary ny fomba tsy mivantana. Misy fahasamihafana lehibe eo amin'ny fomba fitsapana sy ny analytes.
Ny fomba sandwich sandra-antibody indroa no fomba fahita matetika ampiasaina amin'ny sehatra detection volamena koloidaly, izay ampiasaina indrindra hahitana biomolecules be dia be sy antigène particulateur. Ny fomba sandwich misy antibody avo roa heny dia mitaky fanomanana ny antibody iraisan'ny antigen hitsapana. Ny antibody iray dia nasiana marika volamena colloidal ary miorina amin'ny pad conjugate, ary ny antibody iray hafa dia miorina amin'ny tsipika detection (tsipika T) an'ny membrane NC. Ho fanampin'izany, ilaina ny manomana antody faharoa izay mifamatotra manokana amin'ny antibody misy marika volamena (izany hoe antibody misy marika volamena koloida) ary manamboatra azy amin'ny tsipika fifehezana (tsipika C) amin'ny membrane NC.
Rehefa nampiana santionany ilay santionany dia hifindra any amin'ilay pad ohatra izy io, pad conjugate, tsipika T, tsipika C ary pad absorbent (pad wicking) milahatra amin'ny alàlan'ny fitsipiky ny fikorianan'ny capillary. Ity fanehoan-kevitra ity dia aseho amin'ity tabilao manaraka ity:
| Santionany mifindra T conjugate pad | Mifindra amin'ny tsipika T ny santionany | Mifindra amin'ny tsipika C ny santionany | Result | |
|---|---|---|---|---|
| Anaylte dia misy antigène | Antikôdrafia misy marika volamena no nahazoana antigen, lasa sarotra | Ny antibody raikitra amin'ny tsipika T dia hisambotra ilay be pitsiny ary ho hita ny tarika miloko | Ny antibody faharoa dia hisambotra ny antibody misy loko volamena sy ny loko misy loko hita | Tsipika roa hita |
| Anaylte tsy misy antigène | Tsy misy fanehoan-kevitra | Tsy misy fiovana loko | Mitovy etsy ambony | Tsipika C ihany no hita |
Noho izany, rehefa misy tsipika mena roa aseho amin'ny tsipika, dia midika izany fa ny zavatra hosedraina amin'ny santionany dia tsara; raha tsy misy tsipika C fotsiny amin'ny tsipika, dia midika izany fa ratsy ilay zavatra hosedraina ao amin'ilay santionany. Ny fifantohana avo lenta amin'ny fananana dia hanana fehiloha T-line matanjaka kokoa.
Ireo antigène molekiola kely dia sarotra ny manomana antibodies iraisana (kely loatra ny lanjan'ny molekiola, sarotra ny mahita tranokala roa mifamatotra ho an'ny antibodies roa hamehezana miaraka amin'ny fotoana iray), ka ny antigène molekiola kely dia tsy azo tsikaritra amin'ny fomba sandwich antibody roa. Ho an'ny antigène môlekiola kely dia matetika ampiasao ny fomba fifaninanana hamonoana.
Amin'ny fomba fifaninanana, ny antibody misy marika volamena dia raikitra amin'ny cojugate pad o, ary ny tsipika T eo amin'ny membrane NC dia raikitra miaraka amin'ny antigen macromolecular miaraka hosedraina (antigène molekiola kely dia tsy azo apetraka mivantana amin'ny membrane NC. Noho izany , ilaina ny mampiditra molekiola kely simika amin'ny BSA sy zavatra macromolecular hafa ary mamindra azy ireo amin'ny membrane NC). Ny antibody faharoa izay afaka mifamatotra manokana amin'ny antibody misy marika volamena dia mihetsika amin'ny tsipika C.
Rehefa nampiana santionany ilay santionany dia hifindra any amin'ny pad ohatra izy io, pad conjugate, tsipika T, tsipika C ary pad absorbent (pad wicking) milahatra amin'ny alàlan'ny fitsipiky ny fikorianan'ny capillary. Ity fanehoan-kevitra ity dia aseho amin'ity tabilao manaraka ity:
| Santionany mifindra T conjugate pad | Mifindra amin'ny tsipika T ny santionany | Mifindra amin'ny tsipika C ny santionany | Result | |
|---|---|---|---|---|
| Anaylte dia misy antigène | Antikôdrafia misy marika volamena no nahazoana antigen, lasa sarotra | Tsy misy antigen azo tratra. Tsy misy tarika miloko | Ny antibody faharoa dia hisambotra ny antibody misy loko volamena sy ny loko misy loko hita | Tsipika C ihany no hita |
| Anaylte tsy misy antigène | Tsy misy fanehoan-kevitra | Alao ny masonkarônôma misy loko vy sy loko misy loko volamena | Mitovy etsy ambony | Tsipika roa hita |
Noho izany, rehefa misy tsipika mena roa aseho amin'ny tsipika, dia midika izany fa ratsy ilay zavatra hosedraina ao amin'ilay santionany; raha tsy misy tsipika C fotsiny amin'ny tsipika, dia midika izany fa tsara ilay zavatra hosedraina ao amin'ilay santionany. Ny fifantohana avo lenta amin'ny fananana dia hanana fehiloha T-line matanjaka kokoa.
Ny fomba ankolaka dia ampiasaina indrindra hamantarana antivirus. Raha fomba tsy mivantana, ny pad conjugate miorina amin'ny proteinina A misy marika kôlidôla (Protein A dia afaka mifamatotra amin'ny antibody tsy manokana). Ny tsipika T eo amin'ny membrane NC dia raikitra amin'ny antigène izay afaka mifamatotra manokana amin'ny antibody hosedraina, ary ny tsipika C eo amin'ny membrane NC dia miorina amin'ny anti-Protein A antibody.
Rehefa nampiana santionany ilay santionany dia hifindra any amin'ny pad ohatra izy io, pad conjugate, tsipika T, tsipika C ary pad absorbent (pad wicking) milahatra amin'ny alàlan'ny fitsipiky ny fikorianan'ny capillary. Ity fanehoan-kevitra ity dia aseho amin'ity tabilao manaraka ity:
| Santionany mifindra T conjugate pad | Mifindra amin'ny tsipika T ny santionany | Mifindra amin'ny tsipika C ny santionany | Result | |
|---|---|---|---|---|
| Anaylte misy antibody | Proteinina misy marika volamena Antibodiany voababo, lasa be pitsiny | Antigrafia misambotra antigen, tarika loko hita maso | Proteinina A azon'ireo anti-proten Antibodiany sy tarika miloko hita | Tsipika roa hita |
| Anaylte tsy misy antibody | Tsy misy fanehoan-kevitra | Ny antigen dia tsy afaka misambotra antigen, tsy misy loko miova | Ilay antibody misy marika volamena voasambotry ny antibody faharoa, loko misy taratra | Tsipika C ihany no hita |
Noho izany, rehefa misy tsipika mena roa aseho amin'ny tsipika, dia midika izany fa ny zavatra hosedraina amin'ny santionany dia tsara; raha tsy misy tsipika C fotsiny amin'ny tsipika, dia midika izany fa ratsy ilay zavatra hosedraina ao amin'ilay santionany. Ny fifantohana avo lenta amin'ny fananana dia hanana fehiloha T-line matanjaka kokoa.
Antsipiriany misimisy kokoa, jereo Ahoana no fomba hampivoarana fitsapana haingana ny fitsapana fitetezam-paritra?
Ahoana ny fomba hanamboarana automatique fivoriana ho an'ny fitsapana haingana?
Immunochromatography volamena koloidal be mpampiasa amin'ny fitsapana sakafo mandritra ny taona maro. Ohatra, ahoana ny fitsapana ronono miasa amin'ny residu antibiotika amin'ny ronono manta?
Ny zava-mahadomelina antibiotika dia molekiola kely, noho izany, ny fitsapana dia mifidy fomba fifaninanana. Inona ny mekanisma fanehoan-kevitra?
Andao hojerentsika ny firafitry ny tsipika:
Ny kôlôdialy volamena misy soratra hoe antibôlôma dia nosoratana tao lovia tsara. Ny fisarahana amin'ny tsipika, mampitombo ny fotoana fampidirana ary manatsara ny fahatsapana ny fahatsapana.
Mekanisma fanehoan-kevitra mikoriana
Ny fomba Colorimetric amin'ny fandikana ny fitsapana ronono. Ny tsipika fitsapana dia ampitahaina amin'ny tsipika fanaraha-maso mba hamaritana ny vokatra tsara na ratsy. Mandritra ny famokarana mba hifehezana ny habetsaky ny Au-Ab hahatratra ny valin'ny fandrefesana.
Immunochromatography dia teknolojia fitsapana malaza be, be mpampiasa amin'ny vokatra diagnostika vitro, tsy vitan'ny fitsapana sakafo fotsiny. Miaraka amin'ny fanandramana mivantana, ny fanandramana immunochromatography volamena koloidaly dia tsy mila fitaovana lafo vidy, eays hampiasaina, vidiny mora kokoa hanampiana ny olombelona hiaina tsaratsara kokoa, ohatra, fitsapana fitondrana vohoka any an-trano.
Reference:
Ahoana no hanombohana ny famokarana kitapo fanandramana Covid 19