Listeria monocytogenes fluorescence fitsapana PCR amin'ny fotoana tena

Salmonella

PCR fluorescent amin'ny fotoana tena izy amin'ny fikarohana vitro an'ny montertogenes Listeria.

Famaritana: 96 T / boaty
Voatahiry ao amin'ny 2 - 8 ℃ ny kit.
Ny vanim-potoana manan-kery dia 12 volana.
famaritana: 96 T / boaty

mampiasa: PCR fluorescent amin'ny fotoana tena izy amin'ny fikarohana vitro an'ny montertogenes Listeria.

Fitsipika momba ny fikarohana: Ny kitapo dia misy primera manokana Listeria monocytogenes. Rehefa misy santionany monistertogenes Listeria, ny Listeria monocytogenes ADN nalaina taorian'ny fampiroboroboana dia nohamafisin'ny PCR. Nandritra ny fihetsiketsehana, ny fikarohana Loresia monocytogenes-manokana fluorescent probe dia natambatra niaraka tamin'ny asidra noklezina kendrena ary niaraka tamin'izay koa ny anzima Taq Hydrolysis mba hampisaraka ny vondrona fluorescent sy ny vondrona quenching amin'ny famotopotorana: ka ny fisian'ireo monomettogenes Listeria dia azo tsaraina amin'ny fotoana tena. ny fitomboan'ny fluorescence.

Vokatra sy firafitra:
Composition (96T / kit)famaritanaQuantity
Vahaolana fitrandrahana ADN3ml1 tavoahangy
Listeria monocytogenes vahaolana valin'ny PCR1100ul1 tavoahangy
Peho ny anzima (5U / ul)20ul1 tavoahangy
Ny fifehezana tsara ny Listeria monocytogenes40ul1 tavoahangy
Listeria monocytogenes Fanaraha-maso ratsy0.5ml1 tavoahangy
Fitaovana fianarana1
Fepetra fitahirizana sy daty famaranana ny kit:
1. Ny kit dia voatahiry ao amin'ny 2 - 8 ℃.
2. Ny vanim-potoana manan-kery dia 12 volana.

Fitaovana azo ampiharina:
ABI7500, andiany 9600, MJ opticon2, Bio-Rad ary zavamaneno PCR hafa miisa fluorescent dia misy

Fomba fanandramana:
1. Raiso 1ml ny vahaolana enti-mampitombo ao anaty fantsona centrifuge steril 1.5m1, centrifuge amin'ny 10.000rpm mandritra ny 5min, ary ario ny supernatant; ampiasao ny fomba fitrandrahana phenol kloroform klasika mba hitsapana ny modely nalaina na hitahiry azy amin'ny 20C mandra-pitsapana azy.
2. Apetraho amin'ny hafanan'ny efi-trano ny vahaolana misy ny réaction PCR, raiso ny anzima Taq aorian'ny fiempoana, ary ampio ny anzima Taq ao amin'ny 2∪ / fantsona, izany hoe, ny rafitra fanehoan-kevitra tsirairay dia voaomana toy ny: Vahaolana fanehoan-kevitra PCR 22.5u1 + 0.4ulTaq anzima.
3. Ampio ny môdely: esory ny fitrandrahana asidra niokrika voatahiry amin'ny -20 ° C amin'ny hafanan'ny efitrano ary ny centrifuge amin'ny 13,000 rpm mandritra ny 5 minitra. Ny fanaraha-maso ratsy sy tsara dia aody amin'ny hafanan'ny efitrano alohan'ny hampiasana azy. Isaky ny fantsom-pifandraisana PCR dia ampio 2 ul ny môdely na fanaraha-maso ratsy sy tsara voahodina amin'ny dingana 1, afeno ny fantsona, apetaho amin'ny fitaovana PCR, ary noraketinao ny isa azo alaina.
4. Faritra fanamafisana sy fitadiavana eny amin'ny solaitrabe: ny toe-javatra misy dia 95C: 3min, tsingerina 1; 95C: 5sec, 60C: 40sec (fahazoana famantarana), 40 tsingerina. Ny rafitra fanehoan-kevitra dia napetraka ho 25u1.
Ho an'ny fitaovana PCR fluorescence marobe dia apetraka amin'ny Fam fluorescein ny famantarana.

Valim-pitsarana:
Azafady mba jereo ny boky momba ny antsipiriany.

Fitandremana amin'ny fampiasana kit:
1. Ity kit ity dia tsy ampiasaina afa-tsy amin'ny fizahana vitro sy ny fikarohana, azafady mba vakio tsara ny lahatsoratra manontolo amin'ity boky ity alohan'ny hanombohanao mampiasa azy.
2. Ny fizahana dia tsy maintsy zarazaraina mafy: faritra fanomanana alohan'ny PCR-manomana reagents fanandramana; faritra fanodinana santionany-hosedraina santionany, fanodinana modely; faritra detection-fanamafisana PCR, detection.
3. Ho an'ny fenitra fitantanana laboratoara mifandraika amin'izany, azafady mba jereo ny fampiharana ny fenitra fitantanana ho an'ireo laboratoara fanamafisam-peo navoakan'ny tompon'andraikitra nasionaly mifandraika amin'izany.

Raha te-hahalala bebe kokoa ianao, dia mifandraisa aminay

    Fanontaniana Trivia: montertogenes Listeria

    Momba listeria

    Famaritana Listeria

    Listeria dia bakteria anaerobika mahay manavakavaka izay mpiorina amin'ny listeriosis. Listeria dia bakteria miabo Gram-positive an'ny filily matevina rindrina, nomena ny anaran'i Joseph Lister. Ampiasaina amin'ny maha-vector azy ny sakafo ary izy io dia iray amin'ireo otrikaretina mahafaty indrindra amin'ny sakafo.

    Listeria dia manerana izao tontolo izao ary hita amin'ny ankamaroan'ny sakafo. Ny hena, atody, akoho amam-borona, hazandranomasina, vokatra vita amin'ny ronono, legioma sns dia voaporofo fa loharanon'ny aretina Listeria. Ny fanapoizinana Listeria monocytogenes dia mety miteraka aretina amin'ny ra sy ny ati-doha. Firenena maro no nandray fepetra hifehezana ireo monostogenes Listeria amin'ny sakafo ary nametraka fenitra mifanaraka amin'izany.

    Listeria loharano

    Listeria dia voalohany hita tamin'ny 1926 avy amin'ny mpahay siansa anglisy avy any Afrika Atsimo Murray tamina bitro marary. Ho fahatsiarovana ny rain'ny fandidiana famonoana otrikaretina maoderina, Joseph Lister, mpahay fizika anglisy, tamin'ny 1827, dia nantsoina hoe monistertogenes Listeria tao amin'ny Kongresy Iraisam-pirenena Mikrbiolojika faha-1912.

    Karazana listeria

    Ireo monsterstogenes Listeria ekena iraisam-pirenena dia manana ireto karazana fito ireto:
    Listeria monocytogenes, Listeria mutans, Listeria innocolus, Listeria welsii, Listeria sileeri, Listeria monocytogenes, Listeria monocytogenes. Anisan'izany, i L. monocytogenes no hany mety hiteraka aretin'olombelona. Izy io dia aretina iray miteraka aretina zoonotic. Ny fanapoizinana mafy dia mety miteraka areti-mifindra amin'ny ra sy ny ati-doha. Ny Listeria monocytogenes dia nohafohezina ho Listeria monocytogenes, izay bakteria miabo Gram-positive ary an'ny phylum matevina rindrina.

    Listeria aretina

    Ao amin'ny karazana Listeria dia tsy misy afa-tsy ny monistertogenes Listeria ihany no mety hiteraka aretina toy ny meningite, sepsis, afa-jaza ary aretina miteraka eo amin'ny olombelona. Raha voan'ny aretin'i Listeria ny olona iray tsy mahazaka aretina, dia matotra ny aretina ary mahatratra 33% ny taham-pahafatesana.

    Soritr'aretina Listeria

    Ny aretin'ny listeria dia mety miaraka amin'ny tazo, fanaintainan'ny hatoka, fandoavana na fivalanana. Ny endrika sarotra kokoa dia mety hiteraka encephalitis sy endrika meningite manokana. Ny vehivavy bevohoka koa dia ahiana tratran'ny Listeria. Ny vehivavy bevohoka dia in-20 azo inoana fa voan'ny Listeria kokoa noho ny hafa. Na dia tsy misy afa-jaza na miteraka, dia mety voan'io areti-mifindra io ilay zaza vao teraka hatramin'ny nahaterahany, ka tena misy ny tahan'ny fahafatesan'ny olona.

    listeria monocytogenes

    Inona avy ireo listeria monocytogenes

    Listeria monocytogenes dia aretina miteraka aretina zoonotika. Izy io dia mety hiteraka listeriosis amin'ny olona sy ny biby. Aorian'ny aretina dia miseho ho toy ny sepsis, meningite ary sela mononuclear izy io. Satria ny bakteria dia katsentsitra intracellular, miankina amin'ny hery fiarovan'ny sela ny fanesorana azy. Noho izany, ny listeriosis dia amin'ny olona neonates, ny be antitra ary ny olona voan'ny immocompromised. Ny Listeria monocytogenes dia voan'ny otrikaretina indrindra, ary afaka miditra amin'ny vatana amin'ny alàlan'ny maso sy simika amin'ny hoditra ary fonosana moka ka miteraka aretina.

    Fitsinjarana mononomtogenes Listeria

    Ny monistôgenes Listeria dia misy voajanahary, tsy mora ny mihamangatsiaka ary manalefaka, ary mahazaka ny tsindry osmotic ambony. Ny bakteria dia misy amin'ny tany, rano ambonin'ny rano, maloto, rano maloto, zavamaniry, silage, legioma lo, mba hahafahan'ny biby mihinana bakteria mora foana.

    Ny lalan'ny fandefasana monomettogenes Listeria

    Listeria monocytogenes dia mampiasa sakafo matetika ho toy ny mpitsabo areti-mifindra. Izy io dia iray amin'ireo otrikaretina ateraky ny sakafo mahafaty indrindra, ka maty ny 20 ka hatramin'ny 30% ny olona voan'ny aretina. Mbola ambony noho ny an'ny Salmonella sy Botox ny taham-pahafatesana. Ny ankamaroan'ny olona dia mihinana fromazy malefaka, akoho tsy misy hafanana, alika mafana tsy mafana, ronono vaovao, ronono pasteuris, gilasy, steak manta, henan'ondry, salady laisoa, voatabia, voatabia, pie frantsay, lela kisoa mangatsiaka sns. Manodidina ny 80% -90% ny tranga dia vokatry ny sakafo voaloto.
    Ny bakteria dia afaka miditra amin'ny vatana amin'ny alàlan'ny maso ary manimba ny hoditra sy ny membrane mucous ka miteraka aretina. Aorian'ny aretina, ny vehivavy bevohoka dia mamindra ny foetus na ny zaza vao teraka amin'ny alàlan'ny plasenta na ny lakandrano teraka. Ny bakteria mipetraka amin'ny fivaviana sy ny vozon-tranonjaza koa dia mety hiteraka aretina. Ny firaisana ara-nofo koa dia lalana mety hampitana ny aretina, ary misy fironana miakatra.

    Listeria monocytogenes aretina

    Soritr'aretina Listeria monocytogenes

    Na ny Listeria monocytogenes dia marary aorian'ny fidirany amin'ny vatan'olombelona dia mifandraika amin'ny fahalemen'ny bakteria sy ny taona ary ny toetran'ny hery fiarovan'ny mpampiantrano, satria ny bakteria dia bakteria parasitika intraselular, ary ny fanesorana azy avy amin'ny mpampiantrano dia miankina amin'ny hery fiarovan'ny sela. . Noho izany, olona mora tohina dia zaza vao teraka, vehivavy bevohoka ary olon-dehibe mihoatra ny 40 taona. Ho fanampin'izany, ireo mpisotro toaka, olona manana rafitra fiarovan'ny vatana simba na kilema, marary mahazo mpiasan'ny hery fiarovana sy kortikosteroid ary famindrana taova koa dia voan'ny bakteria. Ny fisehoan'ny klinika amin'ny aretina, ny olon-dehibe salama dia manana soritr'aretina malemy toy ny gripa, zaza vao teraka, vehivavy bevohoka, marary tsimatimanota miaraka amin'ny fisefosefoana, mandoa, maimaika hemorrhagic, conjunctivitis suppurative, tazo, fivontosana, koma, fanalan-jaza tampoka, meningitis, Sepsis mandra-pahatongan'ny aretina. fahafatesana.

    Ny fitsaboana Listeria monocytogenes

    Ny penicillin, ampicillin, gentamicin, erythromycin, sns. Dia azo ampiasaina amin'ny fitsaboana aretina Listeria monocytogenes. Ny erythromycine sy ny antibiotika maro karazana dia tsy mahazaka penicillin.

    Ny fisorohana ny listeria monocytogenes

    Ny mononomtogenes Listeria dia afaka miaina ara-dalàna ny fanodinana hafanana, ny fitsaboana ny hafanana dia namono ny vondron'olona bakteria mpifaninana, nahatonga ny monistertogene Listeria ho mora velona raha tsy misy ny tontolo iainana mifaninana, noho izany amin'ny fikarakarana sakafo, ny mari-pana fototra dia tokony hahatratra 70 ° C mandritra ny 2 minitra. Ny listeria monocytogenes dia miely amin'ny natiora, ka na dia nafana loatra aza ny vokatra ary namboarina dia tsy nihetsika tanteraka ny monistôgenes Listeria, saingy mety hiteraka fandotoana faharoa amin'ny vokatra izany, ka aorian'ny fandrahoana dia manakana ny fandotoana faharoa no tena zava-dehibe. Satria mbola afaka mitombo sy miteraka amin'ny 4 ° C ny monomettogenes Listeria, ny sakafo tsy refesina amin'ny vata fampangatsiahana dia mampitombo ny mety ho fanapoizinana ara-sakafo, ary mila hafanaina ny sakafo vata fampangatsiahana alohan'ny fihinanana azy.

    Fitsapana ny mononomtogenes Listeria

    1. Fomba kolontsaina bakteria

    Ny fomba fitsapana nentim-paharazana ho an'ny Listeria amin'ny sakafo dia ny fanatanterahana mialoha ny fampananan-karena na ny fambolena mifantina, ary ny fampiasana ireo zanatany mampiahiahy sy kolontsaina mampihetsi-po amin'ny fanandramana fanehoan-kevitra biokimia, andrana hemolisis ary fanandramana hemolisis (CAM P). Taorian'i Listeria monocytogenes dia lasa serotyped hafa. Ny fampiroboroboana sy ny fampiroboroboana mifantina dia dingana tena ilaina amin'ity fomba ity. Ny fomba fampiroboroboana dia misy indrindra: fomba fampiroboroboana mangatsiaka ary fomba fambolena mari-pana mahazatra. Ny fomba fampiroboroboana mangatsiaka dia kolontsaina amin'ny 4 ° C mandritra ny 30 andro, indraindray aza hatramin'ny herintaona. Amin'ny hafanan'ny efitrano dia mila kolontsaina mandritra ny 24h ka hatramin'ny 7d ny bakteria. Noho izany, ny fomba fitadiavana nentim-paharazana dia mitaky 7-11 andro hanokafana sy hamantarana ireo monostogenes Listeria, noho izany dia lava kokoa ny fizotran'ny fomba nentim-paharazana.

    2. Fanangonam-bolo serum

    Araka ny antigène bakteria sy antigène flagellar, ny LM dia mizara 16 serotypes: 1 / 2a, 1 / 2b, 1 / 2c, 3a, 3b, 3c, 4a, 4ab, 4b, 4c, 4d, 4e, 5, 6a, 6b , 7. Ny rafitra antigen dia tsy misy ifandraisany amin'ny virulence. Ny antony lehibe mahatonga ny olombelona dia ny serotypes 1 / 2a, 1 / 2b, ary 4b, izay mitaky eo amin'ny 90% ny tranga maneran-tany amin'ity aretina ity.

    3. Fomba fanandramana biolojika molekiola

    3 .1 Teknolojia fikarohana momba ny fikarohana
    Ity haitao ity no zavamananaina molekiola voalohany ampiasaina amin'ny fitiliana an'i Listeria
    Mianara teknolojia. Tamin'ny taona 1988, Atin et al. namboarina sy nilahatra ny sombin-doka 500bp an'ny Listeria beta-hemolysin, ary namolavola fizahana oligonucleotide efatra tamin'ity fizotran-javatra ity, nanisy marika hoe 32P, ary nanao fanandramana hybridization dot. dia ratsy tamin'ny karazana bakteria Listeria sy tsy karazana hafa, mampiseho famaritana tsara.

    3.2 Teknolojia detection polymerase chain (PCR)
    Ny fivoaran'ny PCR dia matotra tokoa, ary be mpampiasa amin'ny fikarohana an'i Listeria. Ny primer fanamafisana PCR dia natao mifototra amin'ny filaharana manokana virulence genes of Listeria monocytogenes, ary ny iray dia natao mifototra amin'ny filaharana voafaritra ao amin'ny genome an'ny Listeria monocytogenes. Ny filaharana kendrena matetika ampiasaina dia ny fototarazo virulence toy ny hly A, iap, inl, Dth-18. Ny tombony amin'ny fampiasana ny fomba PCR hamantarana an'i Listeria dia ny mampiavaka ny fomba, fa ny fatiantoka dia ny fahatsapana ambany; ny kolontsaina santionany dia mihamafy aorian'ny fitrandrahana simika, izay manatsara ny taham-pitsikilon'ny santionany; ary moa ve A "velona, ​​tsy azo volena" Listeria monocytogenes dia tsy ho voamariky ny fomba fampitomboana nentim-paharazana.

    Recent Posts

    © copyright 2020 - BALLYA voatokana.
    valopytelefaona findaymari-panondro LinkedIn Facebook Pinterest YouTube RSS amin'ny twitter Instagram Facebook-banga rss-banga linkin-blank Pinterest YouTube amin'ny twitter Instagram