Fitsapana PCR fluorescence amin'ny fotoana tena izy

Salmonella

PCR fluorescent amin'ny fotoana tena amin'ny detection vitro an'ny E coli.

Famaritana: 96 T / boaty
Voatahiry ao amin'ny 2 - 8 ℃ ny kit.
Ny vanim-potoana manan-kery dia 12 volana.
famaritana: 96 T / boaty

mampiasa: PCR fluorescent amin'ny fotoana tena amin'ny detection vitro an'ny e coli.

Fitsipika momba ny fikarohana: Ny kit dia misy primer manokana coli. Rehefa misy e coli ilay santionany, ny ADN e coli nalaina taorian'ny fampiroboroboana dia nohamafisin'ny PCR. Mandritra ny fihetsiketsehana, ny probe fluorescent manokana e coli dia mifangaro miaraka amin'ny asidra noklezina kendrena ary miaraka amin'ny Taq anzima Hydrolysis hampisaraka ny vondrona fluorescent amin'ny vondrona quenching amin'ny probe: ka ny fisian'ny e coli dia azo tsaraina amin'ny fotoana tena. ny fitomboan'ny fluoresence.

Vokatra sy firafitra:
Composition (96T / kit)famaritanaQuantity
Vahaolana fitrandrahana ADN3ml1 tavoahangy
Vahaolana amin'ny fanehoan-kevitra PCR1100ul1 tavoahangy
Peho ny anzima (5U / ul)20ul1 tavoahangy
E fifehezana tsara40ul1 tavoahangy
E coli Fanaraha-maso ratsy0.5ml1 tavoahangy
Fitaovana fianarana1
Fepetra fitahirizana sy daty famaranana ny kit:
1. Ny kit dia voatahiry ao amin'ny 2 - 8 ℃.
2. Ny vanim-potoana manan-kery dia 12 volana.

Fitaovana azo ampiharina:
ABI7500, andiany 9600, MJ opticon2, Bio-Rad ary zavamaneno PCR hafa miisa fluorescent dia misy

Fomba fanandramana:
1. Raiso 1ml ny vahaolana enti-mampitombo ao anaty fantsona centrifuge steril 1.5m1, centrifuge amin'ny 10.000rpm mandritra ny 5min, ary ario ny supernatant; ampiasao ny fomba fitrandrahana phenol kloroform klasika mba hitsapana ny modely nalaina na hitahiry azy amin'ny 20C mandra-pitsapana azy.
2. Apetraho amin'ny hafanan'ny efi-trano ny vahaolana misy ny réaction PCR, raiso ny anzima Taq aorian'ny fiempoana, ary ampio ny anzima Taq ao amin'ny 2∪ / fantsona, izany hoe, ny rafitra fanehoan-kevitra tsirairay dia voaomana toy ny: Vahaolana fanehoan-kevitra PCR 22.5u1 + 0.4ulTaq anzima.
3. Ampio ny môdely: esory ny fitrandrahana asidra niokrika voatahiry amin'ny -20 ° C amin'ny hafanan'ny efitrano ary ny centrifuge amin'ny 13,000 rpm mandritra ny 5 minitra. Ny fanaraha-maso ratsy sy tsara dia aody amin'ny hafanan'ny efitrano alohan'ny hampiasana azy. Isaky ny fantsom-pifandraisana PCR dia ampio 2 ul ny môdely na fanaraha-maso ratsy sy tsara voahodina amin'ny dingana 1, afeno ny fantsona, apetaho amin'ny fitaovana PCR, ary noraketinao ny isa azo alaina.
4. Faritra fanamafisana sy fitadiavana eny amin'ny solaitrabe: ny toe-javatra misy dia 95C: 3min, tsingerina 1; 95C: 5sec, 60C: 40sec (fahazoana famantarana), 40 tsingerina. Ny rafitra fanehoan-kevitra dia napetraka ho 25u1.
Ho an'ny fitaovana PCR fluorescence marobe dia apetraka amin'ny Fam fluorescein ny famantarana.

Valim-pitsarana:
Azafady mba jereo ny boky momba ny antsipiriany.

Fitandremana amin'ny fampiasana kit:
1. Ity kit ity dia tsy ampiasaina afa-tsy amin'ny fizahana vitro sy ny fikarohana, azafady mba vakio tsara ny lahatsoratra manontolo amin'ity boky ity alohan'ny hanombohanao mampiasa azy.
2. Ny fizahana dia tsy maintsy zarazaraina mafy: faritra fanomanana alohan'ny PCR-manomana reagents fanandramana; faritra fanodinana santionany-hosedraina santionany, fanodinana modely; faritra detection-fanamafisana PCR, detection.
3. Ho an'ny fenitra fitantanana laboratoara mifandraika amin'izany, azafady mba jereo ny fampiharana ny fenitra fitantanana ho an'ireo laboratoara fanamafisam-peo navoakan'ny tompon'andraikitra nasionaly mifandraika amin'izany.

Raha te-hahalala bebe kokoa ianao, dia mifandraisa aminay

    Fanontaniana Trivia: E coli

    Momba ny e coli

    E coli, fantatra ihany koa amin'ny hoe Escherichia coli, dia hitan'i Escherich tamin'ny taona 1885. Escherichia coli dia bakteria mikorontana misy fepetra. Amin'ny toe-javatra sasany, dia mety hiteraka aretin-kibo na aretina vokatry ny lalan-drà amin'ny taova sy taova isan-karazany amin'ny olona sy ny biby isan-karazany.

    E habe coli

    Ny habeny dia 0.5 × 1 ~ 3 microns. Chow flagella, afaka mihetsika tsy misy du spores. Izy io dia afaka manondrana siramamy isan-karazany hamokarana asidra sy gazy. Izy io dia bakteria mpiorina mahazatra ao amin'ny tsinain'ny olona sy ny biby. Miditra ao amin'ny tsinay miaraka amin'ny zazakely aorian'ny fiterahana izy ary miaraka amin'ny olombelona mandritra ny androm-piainana, kaonty efa ho 1/3 amin'ny lanjan'ny lanja maina.

    E coli endrika

    E coli dia Brevibacterium, miaraka amin'ny tendrony boribory ary ratsy ny Gram. Indraindray, noho ny tontolo iainana samihafa, ny sela tsirairay dia toa boribory na filamenta; E. coli dia tokana na roa ny ankamaroany, saingy tsy halamina amin'ny endrika rojo lava izy ireo; ny ankamaroan'ny soritr'aretin'i E. coli dia misy kapsily na rafitra mikrokapsules, saingy tsy afaka mamorona spores; ny ankamaroan'ny karazana E. coli dia mitombo fimbriae, ny sasany amin'izany dia fimbriae manokana ampiarahina amin'ny mpampiantrano sy ireo sela na sela hafa.

    E fanasokajiana coli

    Vokatry ny pathogenika
    Amin'izao fotoana izao, ny fanasokajiana ekena iraisam-pirenena dia ahitana karazana E. coli enina, dia ny E. coli (EPEC), tsimokaretina tsinay E. coli (ETEC), ary ny fidiran'ny tsinay izay mety hiteraka aretin-kibo. E coli (EIEC), hemorrhagic tsinay E coli (EHEC), E coli (EAEC) mitambatra ny tsinay sy ny poizina toy ny tsinay Shiga hita tato anatin'ny taona vitsivitsy dia manana E coli (ESIES invasive sasany), ankoatr'izay, misy E coli pathogenic uretra ( UPEC) izay mety hiteraka aretin-tratra urinary, ary ilay mpanentana vao haingana antsoina hoe E. coli (EAggEC).

    Hemolytika
    Raha ny fahaizan'ny E. coli mamokatra hemolysin sy ny fahaizan'ny hemolyze, E. coli dia azo zaraina ho sokajy roa: hemolytic E. coli sy non-hemolytic E. coli.

    Enterotoxigenic
    Raha ny fahaizan'ny E coli mamokatra enterotoxin mandritra ny fizotran'ny aretina dia azo zaraina ho sokajy roa ny E coli: enterotoxigenic E coli sy non-entotoxinogenic E. coli. Enterotoxigenic E. coli dia pathogen manan-danja amin'ny aretim-pivalanana amin'ny olona sy ny biby isan-karazany. Ny famantarana ny enterotoxigenic E. coli dia mamaritra indrindra ny karazana enterotoxin nafenin'ilay E. coli mitoka-monina. Ankoatr'izay, araka ny fahaizan'ny E. coli mamokatra enterotoxin, ampiarahana amin'ny fahatsapany ny enterotoxins samihafa, ny E coli dia azo sokajiana ho karazana enterotoxin.

    E coli aretina

    E. coli dia bakteria monina mahazatra ao amin'ny tsinay biby, ary ny ampahany kely amin'izy ireo dia miteraka aretina amin'ny fepetra sasany. Ny serotypes an'ny E. coli dia mety hiteraka aretin-kibo amin'ny olona na biby, vokatry ny antigens fimbria manokana, poizina pathogenika ary aretina hafa. Ho fanampin'ny aretin-kibo, dia mety hiteraka aretin'ny lalan-dra sy aretin-tratra ary meninges koa izy ireo. Ny aretin-kibo sy ny septika.
    Ny Escherichia coli dia misy vondrona bakteria maromaro miaraka amin'ny pathogenicity samihafa. Ny aretin'olombelona E. coli dia mizara roa amin'ny karazany roa: aretin-kibo sy aretin-kibo extraintestinal.

    Soritr'aretina E coli

    Ny soritr'aretina mahazatra amin'ny tsinay dia mety mivalana. Raha mafy ny aretina dia mety hitranga ny hatairana, mety hidina ny tosidra, ary hitombo ny tahan'ny fo. Raha aretin-kibo izany dia mety hitranga ny fisaleboleboana, fandoavana, tazo, fahita matetika ny urinary aorian'ny aretina E. coli.

    E coli pathogen

    Amin'ny ankapobeny, ny E. coli dia mizara ho vondrona bakteria efatra arakaraky ny fitovizany amin'ny olombelona: E. coli mahazatra, enteropathogenic E. coli, enterotoxigenic E. coli, ary E. coli mpanafika. Ny telo farany dia bakteria pathogenika izay miteraka fivalanana.

    E. coli pathogenesis

    Ny flora tsirairay dia misy serotypes maromaro. Enterotoxigenic Escherichia coli dia afaka mamokatra enterotoxin mahazaka hafanana sy enterotoxin mahazaka hafanana. Ny famokarana ireo enterotoxins roa ireo dia fehezin'ny plasmid. Ny plasmid dia karazana ADN tsy chromosomal izay azo ampitaina mora foana. Ny fifindran'ny plasmida eo amin'ny samy mpiray dia afaka manome ny tadiny tsy mamokatra poizina hahazoana fahaizana mamokatra poizina. Noho ny fandefasana ny plasmid, ny Escherichia coli amin'ny serotika rehetra dia afaka mamokatra enterotoxin sy zanatany, ka manana pathogenisation.

    Fitsaboana E coli

    Voalohany, raha tsy dia lehibe ny soritr'aretin'ny aretina ary malemy ny fivalanana sy ny aretin-kibo, ny fitantanana am-bava ny bifidobacteria dia afaka manatsara ny tsy fetezan'ny gastrointestinal ary mifehy ny aretin'ny mikroflora amin'ny tsinay.
    Raha matotra ny fanaintainan'ny kibo sy ny fivalanana ary misy fivalanan-drano, diniho ny fanomezana fitsaboana anti-inflammatoire toy ny antibiotika quinolone na berberine, ary fanoloana tsiranoka mety hanatsarana ireo soritr'aretin'ny tsy fahampian-drano.

    Avy aiza i e coli

    Escherichia coli dia iray amin'ireo zavamiaina bitika fahita indrindra, zaraina amin'ny natiora ny ankamaroany, ny ankamaroany dia tsy pathogenika, indrindra ny parasy ao amin'ny tsinain'ny olona na biby, ary nantsoin'ny olona hoe "flora ara-dalàna" ny olombelona.

    Fampitana E coli

    Ny loharanom-pahalalana indrindra amin'ny aretin'ny E. E. coli dia ny olona maro karazana pathogens E. coli no mivoaka ao anaty tain'ireo mararin'ny gastrointestinal. Ny lalan'ny fifindran'ny E. coli amin'ireo olona dia amin'ny alàlan'ny làlam-pitaterana fecal-oral, izay mety hiteraka fiparitahan'ny aretina E. coli amin'ny fepetra sasany.

    Enterobacter sakazakii amin'ny raofin-jaza vovoka

    Enterobacter sakazakii dia zavaboary misy eo amin'ny tontolo iainana ary matetika hita amin'ny toerana misy azy sy ny tontolon'ny trano famokarana ny raikan-jaza. Na dia tsy vokatra tsy mitera-doza aza ny raikin-jaza ary mety voaloton'ireo otrikaretina izay mety hiteraka aretina lehibe, raha voaomana tsara sy voatahiry tsara ilay raikin-jaza, dia mety hihena be ny aretina azo avy amin'ny Enterobacter sakazakii. Mba hanomanana soa aman-tsara ny raikan-jaza, dia tsy maintsy diovinao aloha sy estero ny fitaovana fanomanana sakafo sy fikarakarana.

    E fisorohana coli

    1. Ataovy madio ny toerana bai sy ny kojakojan-dakozia, ary ario tsara ny fako.
    2. Ataovy madio hatrany ny tananao ary kosaho matetika ny hoho.
    3. Sasao amin'ny savony sy rano ny tananao alohan'ny hisakafoanana na hikarakarana sakafo. Tokony hosasana koa ny tananao aorian'ny fampiasana ny kabine na fanovana diapia.
    4. Ny rano fisotro dia tokony hampiasaina amin'ny rano fisotro, ary tsara indrindra ny ampangotrahina alohan'ny hisotroana.
    5. Ny sakafo vaovao dia tokony vidiana amin'ny toerana azo itokisana fa tsy hiaro ny mpivaro-tena tsy manana fahazoan-dàlana.
    6. Halaviro ny fihinanana sakafo atahorana be, toy ny ronono izay mbola tsy nohanin'ny sterilization maripana ambany, ary koa steak hamburger tsy masaka, henan'omby ary hena hena hafa.
    7. Rehefa mahandro sakafo dia manaova akanjo apron sy satroka madio ary azo sakanana.
    8. Tokony hosasana tsara ny sakafo.
    9. Ny sakafo mety simba dia tokony hosaron-doha ary apetraka ao anaty vata fampangatsiahana.
    10. Ny sakafo manta sy ny sakafo masaka, indrindra ny omby sy ny henan'omby, dia tokony hohajaina sy hotahirizina mitokana (tahirizo eo ambonin'ilay vata fampangatsiahana sy sakafo manta eo ambaniny ny sakafo masaka) mba hialana amin'ny fahalotoana.
    11. Ny vata fampangatsiahana dia tokony diovina sy atsonika matetika, ary ny mari-pana dia tokony tazonina amin'ny 4 degre Celsius na ambany.
    12. Raha hafanana hatramin'ny 75 degre Celsius ny faritra rehetra amin'ny sakafo, E. coli O157: azo esorina ny H7; noho izany, henan'omby sy steak hamburger dia tokony masaka tsara hatramin'ny 75 degre Celsius mandritra ny 2 ka hatramin'ny 3 minitra, mandra-pihodina tanteraka ny hena masaka Mivolontsôkôlà, ary nanjary mazava ny gravy.
    13. Aza mitantana tànana amin'ny sakafo masaka amin'ny sakafo masaka; raha ilaina dia manaova fonon-tànana.
    14. Ny sakafo dia tokony ho fongana faran'izay haingana aorian'ny fandrahoana.
    15. Raha ilaina ny mitazona ny ambin-tsakafo nandrahoina dia tokony hampangatsiaka sy handevona azy haingana araka izay tratra. Afanaina tsara alohan'ny hisakafoanana. Ny sakafo norobaina dia tokony ariana.

    Fitsapana ho an'ny e coli

    Fomba fanamasinana

    Ity fomba ity dia natao indrindra ho an'ny fambolena E. coli amin'ny mpanelanelana amin'ny 44.5 ° C, izay misy substrate fluorescent ary mila fambolena 24 ora. Ny dingana lehibe dia misy ny fanamasinana, ny kolontsaina fisarahana, ny fanamasinana faharoa, ny fandinihan'ny mikroskoposy, sns.

    Matrix-nanampy laser desorption ionization fotoana-of-sidina spectrometry faobe

    Matrix-nanampy laser desorption ionization fotoana-of-flight spectrometry faobe (MAL-DITOF-MS) fomba dia ny fampifangaroana ny santionany mba ho refesina amin'ny matrix solution amin'ny refy iray, ary hampiasa laser irradiation pulsed hampientanentana ny matrix, nahatonga ny polymer hiteraka ionôna molekiola sy polymerization ion molekiola Ny vatana dia haingam-pandeha ary voamarika ao anaty spectromètre massa-of-flight. Vokatr'izany dia misaraka araka ny isa faobe, namboarina mba hamorona spectrum faobe, ary nodinihina sy ampitahain'ny rindrambaiko mba handefasana sy hamaritana ny spektiva manokana (fantsom-baravarana) hahatratrarana fahasamihafana sy hamantarana ireo karazana mikraoba kendrena na karazana.

    Fomba vakana immunomagnetic

    Ny fotokevitra lehibe amin'ny teknolojia fisarahana dia ny fampiasana vakana andriamby ho mpitatitra sy antibody hanambarana ny viriosy sy ny vakana andriamby, ary avy eo hamita ny hetsika mekanika amin'ny alàlan'ny teknolojia manasaraka hampisaraka an'i E. coli. Raha ampitahaina amin'ny fomba hafa hanasarahana bakteria, ity fomba ity dia misy tombony sasany. Ity teknolojia ity dia afaka manatsara ny taham-pahombiazan'ny fahitana ny Vibrio pathogenika amin'ny santionany, ary ny haitao voadin'ny immomagnetika dia afaka mitsabo zavamiaina bitika isan-karazany amin'ny karazana bakteria samihafa. , Ary manatsara be dia be ny fahombiazan'ny detection.

    Fitsapana fitaovana mandeha ho azy

    Ny fampiasana lehibe ny mpanadihady mandeha ho azy, ity teknolojia ity dia novokarina ary nampiasaina tamin'ny taona 1970. Miaraka amin'ny fivoaran'ny siansa sy ny haitao, ny teknolojia famaritana fitaovana mandeha ho azy dia be mpampiasa, ary tena mety ny miasa, afaka mamonjy fotoana betsaka , kely ny haavon'ny fitsabahana, afaka mamonjy ny herin'olombelona sy ny fidiran'ny fitaovana izy io, ary koa afaka manatsara ny maha-marina ny detection. Amin'ny fizotry ny fampandrosoana ankehitriny, ny fampiharana ny rafitra immunoassay anzima mandeha ho azy dia tena midadasika.

    Bioluminescence ATP

    Nandritra ny fizotry ny fivoarana tato anatin'ny taona vitsivitsy, ny teknolojia bioluminescence dia be mpampiasa, ary teknolojia haingam-pandeha izy io amin'ny fitadiavana zavamiaina bitika. Ao amin'ny sela mavitrika, ny ATP dia vokatra metabolic angovo mahazatra ao aminy, izay afaka manome angovo ilaina mandritra ny fiasa ara-batana amin'ny sela. Ary, ity haitao ity dia afaka mitazona atiny iray ao anatin'ny faritra iray ao amin'ny vatana velona. Ny teknolojia detection an'ny Escherichia coli amin'ny sakafo dia afaka mandray ny fomba fotometry fluorescence, satria ny antony mahatonga ny zavamananaina hazavana dia ny anjara asan'ny luciferase, izay miteraka ny vokatry ny famoahana hazavana. Ny akora dia avy amin'ny afon'afo any Amerika Avaratra ary afaka mamoaka ny fitrandrahana fluorescein. Na izany aza, tsy milamina ny akora ary afaka mamotika haingana ny fluorescence. Ankoatr'izay, ny fizotran'ny teknolojia detection dia haingana dia haingana, ary mora entina ilay fitaovana, tena mety amin'ny detection eo an-toerana.

    Recent Posts

    © copyright 2020 - BALLYA voatokana.
    valopytelefaona findaymari-panondro LinkedIn Facebook Pinterest YouTube RSS amin'ny twitter Instagram Facebook-banga rss-banga linkin-blank Pinterest YouTube amin'ny twitter Instagram