Prueba de antígeno COVID-19 es un inmunoensayo de flujo lateral destinado a la detección cualitativa de antígenos de la nucleocápside del SARS-CoV-2 en hisopos nasofaríngeos y orofaríngeos de individuos que son sospechosos de COVID-19 por su proveedor de atención médica.
Los resultados son para la identificación del antígeno de la nucleocápside del SARS-CoV-2. El antígeno es generalmente detectable en hisopos nasofaríngeos y orofaríngeos durante la fase aguda de la infección. Los resultados positivos indican la presencia de antígenos virales, pero es necesaria una correlación clínica con el historial del paciente y otra información de diagnóstico para determinar el estado de la infección. Los resultados positivos no descartan infección bacteriana o coinfección con otros virus. Es posible que el agente detectado no sea la causa definitiva de la enfermedad.
Los resultados negativos no descartan la infección por SARS-CoV-2 y no deben usarse como la única base para el tratamiento o las decisiones de manejo del paciente, incluidas las decisiones de control de infecciones. Los resultados negativos deben considerarse en el contexto de las exposiciones recientes de un paciente, el historial y la presencia de signos y síntomas clínicos compatibles con COVID-19, y confirmarse con un ensayo molecular, si es necesario para el manejo del paciente.
Prueba de antígeno COVID-19 está diseñado para ser utilizado por personal de laboratorio clínico capacitado específicamente instruido y capacitado diagnóstico in vitro procedimientos.
Los nuevos coronavirus (SARS-CoV-2) pertenecen al género β. COVID-19 es una enfermedad infecciosa respiratoria aguda. Las personas generalmente son susceptibles. Actualmente, los pacientes infectados por el nuevo coronavirus son la principal fuente de infección; Las personas infectadas asintomáticas también pueden ser una fuente infecciosa.
Según la investigación epidemiológica actual, el período de incubación es de 1 a 14 días, principalmente de 3 a 7 días. Las principales manifestaciones incluyen fiebre, fatiga y tos seca. En algunos casos se encuentran congestión nasal, secreción nasal, dolor de garganta, mialgia y diarrea.
Prueba de antígeno COVID-19 es un inmunoensayo basado en el principio de la técnica sándwich de doble anticuerpo. Prueba de antígeno COVID-19 está diseñado para detectar el antígeno de la nucleocápside del SARS-CoV-2 en hisopos nasofaríngeos y orofaríngeos, de pacientes que su proveedor de atención médica sospecha de COVID-19.
Durante la prueba, una muestra migra hacia arriba por acción capilar. Los antígenos del SARS-CoV-2, si están presentes en la muestra, se unirán a los conjugados de anticuerpos. Luego, el complejo inmune es capturado en la membrana por el anticuerpo monoclonal de proteína de nuclenocápsida del SARS-Co-2 prerrecubierto, y aparecerá una línea de color visible en la región de la línea de prueba que indica un resultado positivo. En ausencia de antígenos del SARS-CoV-2, no se formará una línea de color en la región de la línea de prueba, lo que indica un resultado negativo.
Para que sirva como control de procedimiento, siempre aparecerá una línea de color en la región de la línea de control, lo que indica que se ha agregado el volumen adecuado de muestra y que se ha producido la absorción de la membrana.
El casete de prueba contiene una tira de membrana recubierta con anticuerpo monoclonal de proteína de nuclenocápsida anti-SARS-CoV-2 en la línea de prueba T, y una almohadilla de tinte que contiene oro coloidal junto con el anticuerpo monoclonal de la proteína de la nuclenocapside del SARS-CoV-2.
La cantidad de pruebas se imprimió en la etiqueta.
Materiales suministrados
Materiales necesarios pero no proporcionados
Las muestras obtenidas temprano durante el inicio de los síntomas contendrán los títulos virales más altos; las muestras obtenidas después de cinco días de síntomas tienen más probabilidades de producir resultados negativos en comparación con un ensayo de RT-PCR. La recolección inadecuada de muestras, la manipulación y / o transporte inadecuados de las muestras pueden producir un resultado falso negativo; por lo tanto, se recomienda encarecidamente la capacitación en la recolección de muestras debido a la importancia de la calidad de las muestras para generar resultados de prueba precisos.
Muestra de hisopado nasofaríngeo
Inserte un hisopo minipit con un eje flexible (alambre o plástico) a través de la fosa nasal paralela al paladar (no hacia arriba) hasta que encuentre resistencia o la distancia sea equivalente a la de la oreja a la fosa nasal del paciente, lo que indica contacto con la nasofaringe. El hisopo debe alcanzar una profundidad igual a la distancia desde las fosas nasales hasta la abertura exterior de la oreja. Frote y enrolle suavemente el hisopo. Deje el hisopo en su lugar durante varios segundos para que absorba las secreciones. Retire lentamente el hisopo mientras lo gira. Las muestras se pueden recolectar de ambos lados usando el mismo hisopo, pero no es necesario recolectar muestras de ambos lados si la minipunta está saturada con el líquido de la primera recolección. Si un tabique desviado o una obstrucción crea dificultades para obtener la muestra de una fosa nasal, utilice el mismo hisopo para obtener la muestra de la otra fosa nasal.
Muestra de hisopado orofaríngeo
Inserte el hisopo en las áreas posteriores de la faringe y las amígdalas. Frote el hisopo sobre los pilares amigdalares y la orofaringe posterior y evite tocar la lengua, los dientes y las encías.
Preparación de la muestra
Una vez recolectadas las muestras de torunda, la torunda se puede almacenar en el reactivo de extracción que se proporciona con el kit. Además, se puede almacenar sumergiendo la cabeza del hisopo en un tubo que contenga de 2 a 3 ml de solución de conservación de virus (o solución salina isotónica, solución de cultivo de tejidos o tampón de fosfato).
Transporte y almacenamiento de muestras
Las muestras recién recolectadas deben procesarse lo antes posible, pero a más tardar una hora después de la recolección de la muestra. La muestra recolectada puede almacenarse a 2-8 ℃ por no más de 24 horas; Almacene a -70 ℃ durante mucho tiempo, pero evite ciclos repetidos de congelación-descongelación.
Deje que el dispositivo de prueba y las muestras se equilibren a la temperatura (15-30 ℃ o 59-86 ℉) antes de la prueba.
Positivo: * Aparecen dos líneas. Una línea coloreada debe estar en la región de control (C) y otra línea coloreada aparente adyacente debe estar en la región de prueba (T). Positivo para la presencia del antígeno nucleocápsido del SARS-CoV-2. Los resultados positivos indican la presencia de antígenos virales, pero es necesaria una correlación clínica con el historial del paciente y otra información de diagnóstico para determinar el estado de la infección. Los resultados positivos no descartan la infección bacteriana o la coinfección con otros virus. Es posible que el agente detectado no sea la causa definitiva de la enfermedad.
Negativo: Aparece una línea de color en la región de control (C). No aparece ninguna línea en la región de prueba (T). Los resultados negativos son presuntivos. Los resultados negativos de la prueba no descartan la infección y no deben utilizarse como la única base para el tratamiento u otras decisiones de manejo del paciente, incluidas las decisiones de control de infecciones, particularmente en presencia de signos y síntomas clínicos consistentes con COVID-19, o en aquellos que han sido en contacto con el virus. Se recomienda que estos resultados se confirmen mediante un método de prueba molecular, si es necesario, para el manejo del paciente.
No válido: la línea de control no aparece. Un volumen de muestra insuficiente o técnicas de procedimiento incorrectas son las razones más probables de la falla de la línea de control. Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo casete de prueba. Si el problema persiste, deje de usar el lote inmediatamente y comuníquese con su distribuidor local.
Se incluye un control de procedimiento en la prueba. Una línea de color que aparece en la región de control (C) se considera un control de procedimiento interno. Confirma un volumen de muestra suficiente, una absorción adecuada de la membrana y una técnica de procedimiento correcta.
Los estándares de control no se suministran con este kit. Sin embargo, se recomienda que los controles positivos y negativos se prueben como una buena práctica de laboratorio para confirmar el procedimiento de prueba y verificar el desempeño adecuado de la prueba.
Límite de detección (sensibilidad analítica)
El límite de detección (LoD) del Prueba de antígeno COVID-19 es 5 x 102.67 DICT50 / ml (virus del SARS-CoV-2 cultivado).
Reactividad cruzada (especificidad analítica)
Se ha estudiado la reactividad cruzada con los siguientes cultivos de virus o bacterias con cierta concentración. Los resultados fueron negativos cuando se probaron con la prueba rápida de antígeno COVID-19:
| Virus / Bacterias | Concentración | Resultados |
|---|---|---|
| Gripe A (H1N1) | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Gripe A (H3N2) | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Gripe B (Yamagata) | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Gripe B (Victoria) | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| adenovirus | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Metapneumovirus humano | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Virus de la parainfluenza | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Virus sincitial respiratorio | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Streptococcus pyogenes | 1 × 10 ^ 7 UFP / ml | - |
| Candida albicans | 1 × 10 ^ 7 UFP / ml | - |
| Mycoplasma pneumoniae | 1 × 10 ^ 7 UFP / ml | - |
| Chlamydia pneumoniae | 1 × 10 ^ 7 UFP / ml | - |
| Legionella pneumophila | 1 × 10 ^ 7 UFP / ml | - |
| Coronavirus humano 229E | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Coronavirus humano OC43 | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Coronavirus humano NL63 | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
| Coronavirus humano HKU1 | 1 × 10 ^ 6 UFP / ml | - |
Rendimiento clínico
Estimar el desempeño clínico entre Prueba de antígeno COVID-19 Casete y el comparador de PCR, se recolectaron 162 hisopos nasofaríngeos de pacientes con sospecha de COVID-19.
Datos resumidos de la prueba rápida de antígeno COVID-19 mediante hisopado nasofaríngeo como se muestra a continuación:
| Antígeno COVID-19 | RT-PCR | Total | ||
| Positivo | Negativo | |||
| BALLYA | Positivo | 27 | 0 | 27 |
| Negativo | 5 | 130 | 135 | |
| Total | 32 | 130 | 162 | |
Concordancia de porcentaje positivo (PPA) = 84.38% (27/32), (IC del 95%: 68.25% ～ 93.14%)
Acuerdo de porcentaje negativo (NPA) = 100% (130/130), (IC del 95%: 97.13% ～ 100%)