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Analizar cómo existen las aflatoxinas en la leche en polvo

Publicado el  11 de noviembre., Editado por Samantha, Categoría  

Aflatoxina, como micotoxina, es un metabolito de hongos que se produce cuando el grano o forraje fresco no se seca y almacena a tiempo, y existe ampliamente. Debido a su fuerte toxicidad y carcinogenicidad, se han establecido regulaciones estrictas en las normas alimentarias nacionales y las normas alimentarias. Aflatoxina M1 pertenece a la micotoxina y es el metabolito de hidroxilación de la aflatoxina B1 en animales. Es altamente tóxico y cancerígeno, debe ser impedido de ser agregado a la comida. Porque es perjudicial para tejido hepático y puede inducir alérgico a la leche y cáncer de hígado, fue catalogado como carcinógeno por QUIENES Cancer Research Institute ya en 1993.

Debido al bajo contenido y la estructura similar de las aflatoxinas, se requiere una alta sensibilidad y especificidad del método de detección, que integra la separación y la detección. En este artículo, la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) estaba acostumbrado a analizar aflatoxinas. Se superó el problema del bajo contenido de aflatoxinas y se obtuvo un resultado de alta sensibilidad.

Pretratamiento de la muestra

La leche en polvo de mercados de leche se toman 5 gy se colocan en un frasco dosificador de 100 ml. La leche en polvo se disuelve agregando 20 mL de agua tibia a 50 grados Celsius para hacerla oscilar durante los 30S. Se agrega el cloruro de sodio para que se disuelva oscilando por 2 g. Se agregan 50 ml de acetonitrilo para oscilar durante el 30S. Después de mezclar, se agrega acetonitrilo a la botella para alcanzar la escala. La oscilación del scroll lo hace homogéneo. Filtración, 40 mL de filtrado, flujo de nitrógeno a 40 ° C hasta casi seco. El residuo se disolvió añadiendo 20 ml de acetonitrilo al 10%. La columna de afinidad se lavó con 10 ml de agua después de que la muestra pasara completamente por la columna de afinidad.

Por último, se utilizaron 2 ml de acetonitrilo para la elución. Se recogieron 1.5 ml de eluyente y se secaron con nitrógeno. Agregar 200 uL de hexano y 200 uL de ácido trifluoroacético, agitar y mezclar, reaccionar a 40 ° C durante 10 minutos, sacar, secar bajo flujo de nitrógeno, agregar 10 ml de acetonitrilo al 0.5%, agitar durante 10 segundos.

condición experimental

Tipo de instrumento: Dionex Ultimate 3000 Series
Bomba: LPG-3400SD
Muestreador automático: WPS-3000SL
Caja de temperatura de columna: TCC-3000RS
Detector: FLD
Software de cromatografía: cromatografía de Chromeleon Sistema de datos
Tipo de detector, parámetros de trabajo y número de S / N:
Detector de fluorescencia, FLD-3400
Tiempo de respuesta = 1

Temperatura nominal de la celda de flujo de FLD = 35.00 [C]
FLD FlowCell ReadyTempDelta = 1.00 [C]
BaselineBehavior = Adjuntar
Tasa de recopilación de datos nominal = 10.00 [Hz]
Emisión 1.ExWavelength = 365.0 [nm]
Emisión 1. Longitud de onda Em = 435.0 [nm]
Emisión 1. Sensibilidad = 6
Emisión 1.PMT = Auto
Emisión 1. FilterWheel = Auto
Condiciones cromatográficas:

Condiciones cromatográficas
Condiciones cromatográficas

Columna cromatográfica:
Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 5 um, 100 x 2.1 mm No. 25005-102130
Fase móvil:
Volumen de muestreo: 20 mL
Velocidad de flujo: 800 mL / min
Temperatura de la columna: 25 C

ESPECTRO EXPERIMENTAL
Fig.1 Cromatograma de determinación de muestras (1 ppb más cromatograma estándar; 2 cromatogramas de muestra en blanco)

conclusión
conclusión

En este artículo, se analizaron las aflatoxinas B1, B2, G1, G2, M1 en sésamo utilizando Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 5 micrones, columna de 100 x 2.1 mm, derivatización precolumna combinada con detector de fluorescencia. Se obtuvieron buenos picos, separación y resultados de detección de alta sensibilidad.

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