Aflatoxina, como micotoxina, es un metabolito de hongos que se produce cuando el grano o forraje fresco no se seca y almacena a tiempo, y existe ampliamente. Debido a su fuerte toxicidad y carcinogenicidad, se han establecido regulaciones estrictas en las normas alimentarias nacionales y las normas alimentarias. Aflatoxina M1 pertenece a la micotoxina y es el metabolito de hidroxilación de la aflatoxina B1 en animales. Es altamente tóxico y cancerígeno, debe ser impedido de ser agregado a la comida. Porque es perjudicial para tejido hepático y puede inducir alérgico a la leche y cáncer de hígado, fue catalogado como carcinógeno por OMS Cancer Research Institute ya en 1993.
Debido al bajo contenido y la estructura similar de las aflatoxinas, se requiere una alta sensibilidad y especificidad del método de detección, que integra la separación y la detección. En este artículo, la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) estaba acostumbrado a analizar aflatoxinas. Se superó el problema del bajo contenido de aflatoxinas y se obtuvo un resultado de alta sensibilidad.
Pretratamiento de la muestra
La leche en polvo de mercados de leche se toman 5 gy se colocan en un frasco dosificador de 100 ml. La leche en polvo se disuelve agregando 20 mL de agua tibia a 50 grados Celsius para hacerla oscilar durante los 30S. Se agrega el cloruro de sodio para que se disuelva oscilando por 2 g. Se agregan 50 ml de acetonitrilo para oscilar durante el 30S. Después de mezclar, se agrega acetonitrilo a la botella para alcanzar la escala. La oscilación del scroll lo hace homogéneo. Filtración, 40 mL de filtrado, flujo de nitrógeno a 40 ° C hasta casi seco. El residuo se disolvió añadiendo 20 ml de acetonitrilo al 10%. La columna de afinidad se lavó con 10 ml de agua después de que la muestra pasara completamente por la columna de afinidad.
Por último, se utilizaron 2 ml de acetonitrilo para la elución. Se recogieron 1.5 ml de eluyente y se secaron con nitrógeno. Agregar 200 uL de hexano y 200 uL de ácido trifluoroacético, agitar y mezclar, reaccionar a 40 ° C durante 10 minutos, sacar, secar bajo flujo de nitrógeno, agregar 10 ml de acetonitrilo al 0.5%, agitar durante 10 segundos.
condición experimental
Tipo de instrumento: Dionex Ultimate 3000 Series
Bomba: LPG-3400SD
Muestreador automático: WPS-3000SL
Caja de temperatura de columna: TCC-3000RS
Detector: FLD
Software de cromatografía: cromatografía de Chromeleon Sistema de datos
Tipo de detector, parámetros de trabajo y número de S / N:
Detector de fluorescencia, FLD-3400
Tiempo de respuesta = 1
Temperatura nominal de la celda de flujo de FLD = 35.00 [C]
FLD FlowCell ReadyTempDelta = 1.00 [C]
BaselineBehavior = Adjuntar
Tasa de recopilación de datos nominal = 10.00 [Hz]
Emisión 1.ExWavelength = 365.0 [nm]
Emisión 1. Longitud de onda Em = 435.0 [nm]
Emisión 1. Sensibilidad = 6
Emisión 1.PMT = Auto
Emisión 1. FilterWheel = Auto
Condiciones cromatográficas:
Columna cromatográfica:
Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 5 um, 100 x 2.1 mm No. 25005-102130
Fase móvil:
Volumen de muestreo: 20 mL
Velocidad de flujo: 800 mL / min
Temperatura de la columna: 25 C
ESPECTRO EXPERIMENTAL
Fig.1 Cromatograma de determinación de muestras (1 ppb más cromatograma estándar; 2 cromatogramas de muestra en blanco)
En este artículo, se analizaron las aflatoxinas B1, B2, G1, G2, M1 en sésamo utilizando Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 5 micrones, columna de 100 x 2.1 mm, derivatización precolumna combinada con detector de fluorescencia. Se obtuvieron buenos picos, separación y resultados de detección de alta sensibilidad.
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