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Célula somatica
1. Definición
Las células somáticas de la leche cruda suelen estar compuestas por macrófagos, linfocitos, neutrófilos polimorfonucleares y una pequeña cantidad de células epiteliales del tejido mamario. El número total de células somáticas (scc) contenidas en cada mililitro de leche cruda es un indicador cuantitativo de su calidad. Y contador de células somáticas puede contar las células somáticas en la leche. Tomando la leche de vaca cruda como ejemplo, en circunstancias normales, hay alrededor de 20,000 a 200,000 células individuales por mililitro de leche de vaca cruda. Sin embargo, cuando el sistema de lactancia es atacado por bacterias, infectadas y dañadas, la cantidad de glóbulos blancos aumentará significativamente de 500,000 / ml a 1 millón / ml o incluso más.
La concentración de células somáticas también está estrechamente relacionada con el manejo de la cría de animales y inocuidad de los alimentos. En la cría de animales, refleja directamente la salud de la ubre y la capacidad potencial de producción de leche de las vacas lecheras; en seguridad alimentaria, está estrechamente relacionado con la calidad, el sabor y los elementos de la leche. El recuento preciso de células somáticas en la leche cruda es muy importante para la gestión de la salud del ganado y el control de la calidad de la leche.
2. El número medio de células somáticas en cada país.
| País | Células promedio / ml | Año | Max. Límite de celdas |
| América | 330,000 | 2008 | 750,000 |
| Canada | 260,000 | 2008 | 500,000 |
| England | 200,000 | 2004 | 400,000 |
| Francia | 100.000 - 200.000 | 2004 | 400,000 |
| Países Bajos | 210,000 | 2004 | 400,000 |
| Bélgica | 203,500 | 2004 | 400,000 |
| Alemania | 177,000 - 184,000 | 2004 | 400,000 |
| Suiza | 139,000 | 2004 | 400,000 |
| Hungría | 250,000 - 260,000 | 2004 | 400,000 |
| Finlandia | 130,000 | 2003 | 400,000 |
| Checo | 259,000 | 2002 | 400,000 |
| Letonia | 230,000 - 260,000 | 2001 | 400,000 |
| China | 300,000 | 2010 | 600,000 |
¿Qué significa el contador de células somáticas?
1. Definición
La contador de células somáticas es un instrumento de alta gama, especialmente para la industria láctea. Se utiliza principalmente en el control de calidad y desarrollo de productos de diversos productos lácteos, así como en el recuento preciso de células somáticas en la leche para mejorar la evaluación de la calidad de la leche líquida y proporcionar datos científicos cuantificables para la prevención y el tratamiento de enfermedades en vacas lecheras en el pasto.
2. Indicadores de prueba
La contador de células somáticas para leche puede contar el contenido de células somáticas en la leche cruda para guiar el manejo de los pastos y el desarrollo de productos lácteos.
3. Aplicación
- La herramienta principal para la gestión del rancho.
Para cumplir con los requisitos de las explotaciones ganaderas para mejorar la calidad de la leche cruda, es necesario conocer la información correcta sobre la condición fisiológica de cada vaca. Los datos del contenido de componentes de producción de leche y del contenido de células somáticas obtenidos por este método se pueden utilizar para: optimización de la alimentación; selección de cría; detección precoz de mastitis subclínica.
- La detección temprana de mastitis subclínica en vacas lecheras puede reducir las pérdidas
La mastitis de las vacas lecheras es la enfermedad de las vacas lecheras más cara en los pastos. Gastos de veterinaria, antibióticos, leche retenida, producción reducida, precios más bajos de compra de leche y retiro de vacas enfermas, etc. La pérdida promedio por caso es de aproximadamente $ 250-300.
La mastitis clínica es la secreción anormal de leche de las vacas lecheras con agrandamiento de los senos. La mastitis subclínica no provoca cambios visibles, por lo que es más difícil de detectar. Pero en la etapa de mastitis subclínica, la producción de leche de las vacas lecheras se ha reducido considerablemente. Cuando una vaca en el hato tiene síntomas de mastitis clínica, 15 a 40 vacas sufren de mastitis subclínica, lo que significa que la pérdida potencial causada por una infección no detectada es enorme.
La mejor manera de encontrar mastitis subclínica es hacer un seguimiento del registro de células somáticas de cada muestra de leche de vaca mes a mes, al igual que la organización de mejoramiento de la cría de ganado lechero DHI.
- Garantice una mejor calidad del producto, vida útil y beneficios
Desde la perspectiva de la industria láctea, los beneficios de clasificar la compra de leche cruda en función del contenido de células somáticas son obvios, porque la leche cruda con alto contenido de células somáticas puede conducir a:
A. Se reduce el contenido de proteína, grasa y lactosa, lo que resulta en una disminución en la producción de queso, etc.
B. El aumento de la actividad de la lipasa y el contenido de ácidos grasos libres provocan ranciedad en los productos terminados y acortan la vida útil.
C.Los niveles elevados de inmunoglobulina tienen efectos secundarios sobre la fermentación de la leche.
D. El aumento de sodio y cloruro producirá un desagradable sabor a sal.
4. Configuration
- Unidad de limpieza automática
- Mezclador de tintura de muestra única
- Unidad de control por microprocesador
- Unidad de control por microprocesador
- Software de comunicación del sistema de limpieza automático
- Citómetro de flujo
- Interfaz de comunicación serial
- Con disco duro y disco duro
- Interfaz de impresora paralela
- Fotomultiplicador doble
- Pantalla electrónica
- Unidad de medida de celda de flujo
- Software de control
- Repuestos por 1 año
- Detector de muestras
- Agitador de muestras
- Impresora
¿Cómo se calculan las células somáticas en la leche?
1. Tecnología de detección existente
La existencia recuento de células somáticas para la leche La tecnología de detección se dirige principalmente a las células somáticas bovinas, incluidos los métodos directos e indirectos.
El método indirecto consiste principalmente en detectar los cambios en las propiedades físicas y químicas de la leche provocados por el aumento de células somáticas, reflejando así indirectamente el número total de células somáticas bovinas; el método directo detecta y cuenta directamente las células.
Los métodos indirectos comunes incluyen el recuento de células de California (CMT), la prueba de mastitis de Wisconsin (WMT), el método de viscosidad, etc. Todos utilizan tensioactivos para liberar ADN en las células y los agregados y micelas de ADN diana. El principal inconveniente de estos métodos es que las características físicas y químicas mencionadas anteriormente no son lo suficientemente típicas para medir coloides y viscosidad. Se producirán grandes errores cuando la leche no esté fresca, el contenido de grasa sea demasiado alto y la diferencia de temperatura sea demasiado grande.
El más clásico de los métodos directos es el método de microscopía manual, pero debido a que su operación depende demasiado del trabajo manual, es reemplazado gradualmente por la citometría de flujo. La tecnología de citometría de flujo tiene como objetivo diluir e impulsar las células que se han teñido previamente con fluorescencia en el fluido de la vaina, de modo que puedan contarse con precisión una por una a través del sistema de detección óptica. Como la tecnología de detección de células más avanzada en la actualidad, tiene una velocidad de detección rápida y alta precisión, pero también tiene muchos defectos, como un proceso de operación complicado, un alto precio unitario del equipo y un alto costo de uso, y es imposible observar la morfología celular.
2. Seis tipos de métodos de recuento de células somáticas (principalmente para leche cruda)
- Microscopía
- Principio
La leche fresca que se va a analizar se unta en un portaobjetos de vidrio para formar una película, se seca, se tiñe y las células cuyos núcleos se pueden teñir claramente con azul de metileno se cuentan al microscopio.
- Instrumentos y reactivos
Instrumentos:- Microscopio: aumento X500 o X1000, con ocular graduado, micrómetro y platina mecánica;
- micro jeringa;
- portaobjetos de vidrio;
- baño de agua;
- horno eléctrico;
- embudo de núcleo de arena;
- secador de pelo;
- incubadora.
Reactivos: 95% de etanol, tetracloroetano o tricloroetano, azul de metileno, ácido acético glacial, ácido bórico.
- Pasos del método
- Añadir 54 ml de etanol y 40 ml de tetracloroetano en un matraz Erlenmeyer de 250 ml y agitar bien. Calentar en agua a 65 ° C durante 3 minutos, sacarlo y agregar 0.6 g de azul de metileno, mezclar bien y colocar en el frigorífico una vez enfriado. Después de sacarlo, agregue 6 ml de ácido acético glacial, mezcle bien, filtre con un embudo de núcleo de arena, póngalo en una botella de reactivo y guárdelo a temperatura ambiente para su uso posterior.
- La leche cruda recolectada debe almacenarse a 2-6 ° C. Si no se determina dentro de las 6 horas, agregue ácido bórico para la antisepsia. La concentración de ácido bórico en la muestra no supera los 0.6 g / 100 ml. Almacene en condiciones refrigeradas (2-6 ℃) por no más de 24 horas.
- Calentar la leche cruda en un baño de agua a 35 ° C durante 5 minutos, mezclarla y enfriarla a temperatura ambiente para evitar que las irregularidades de la muestra interfieran con los resultados de la medición, como la flotación de grasa.
- Después de limpiar el portaobjetos de vidrio con etanol, séquelo con papel para lentes, llévelo para que se seque y enfríe a temperatura ambiente.
- Use microinyección para extraer 0.01 ml de muestra, inyecte la muestra de manera plana en el portaobjetos de vidrio exterior, colóquela inmediatamente en la incubadora y colóquela horizontalmente durante 5 minutos para formar una película de muestra de espesor uniforme. Hornee para secar en una estufa eléctrica, sumerja la película de muestra seca en el portaobjetos en la solución de tinción durante 10 minutos, sáquela y airee. Sumerja la membrana de muestra teñida en agua para eliminar la solución de teñido restante y manténgala a prueba de polvo después del secado.
- Fije el portaobjetos de vidrio en la platina del microscopio, usando luz natural o use una fuente de luz eléctrica, lente de condensador, lente de inmersión en aceite de alta potencia para aumentar la intensidad de la luz transmitida.
- La etapa mecánica de movimiento unidireccional cuenta las células cromosómicas en los portaobjetos en cada campo de visión. Las células somáticas que están claramente en el campo de visión o más de la mitad de la forma en el campo de visión se utilizan para el recuento, y el número de células somáticas no debe ser inferior a 400.
- CMT
- Solicitud
La CMT se utiliza principalmente para el diagnóstico rápido de mastitis latente en vacas lecheras lactantes, el seguimiento rutinario del estado de salud de las mamas de las vacas lecheras lactantes, el estudio general de la incidencia de mastitis latente en rebaños lactantes y la evaluación de la calidad higiénica de las vacas lecheras. Leche.
- Principio
El principio es que, bajo la acción de sustancias tensioactivas y fármacos alcalinos, las células somáticas de la leche se destruyen y se libera ADN, que además actúa para hacer que la leche se precipite o forme un gel. Cuantas más células somáticas, más precipitación o gel se produce, lo que diagnostica indirectamente el grado de mastitis e inflamación. Este método es un método aceptado internacionalmente para el diagnóstico de mastitis recesiva, que se caracteriza por su sencillez y rapidez.
- Método
- La muestra se recolecta del área de ordeño para ser inspeccionada, deseche las dos primeras leches y exprima las muestras de leche en los vasos de inspección de la bandeja de inspección.
- Incline la bandeja de prueba (aproximadamente a 60 ° C), deseche el exceso de leche y deje aproximadamente 2 ml de muestra de leche en la taza de prueba.
- Agregue 2 ml de reactivo de diagnóstico (diluyente) para vacas lecheras en cada taza de prueba.
- Agite en círculos concéntricos horizontales durante 10-30 segundos para mezclar completamente la muestra de leche con el reactivo de diagnóstico para vacas lecheras.
- criterios de juicio
Una vez que la CMT y la leche están completamente mezcladas, se juzga en función de la presencia o ausencia de aglutinados y la cantidad y propiedades de los aglutinados.
Negativo (-): El número de células es 0-200,000 / ml: la solución mezclada es líquida. Cuando se inclina la placa de prueba, el líquido se mueve suavemente y no hay sedimentos en el fondo de la taza.
Sospechoso (±): El número de células es 150,000-500,000 / ml: la mezcla es líquida. Cuando se inclina la placa de prueba, aparece una pequeña cantidad de sedimento en el fondo de la taza y el sedimento desaparece inmediatamente después de una pequeña sacudida.
Positivo débil (+): El número de células es 400,000-1.5 millones / ml: aparece una pequeña cantidad de sedimento viscoso delgado en el fondo de la copa, pero no es gelatinoso. Cuando se inclina el disco de prueba, el sedimento se esparce en el fondo del plato y tiene cierta adherencia.
Positivo (++): El número de células es de 800,000 a 5 millones / ml: el fondo de la copa tiene una gran cantidad de sedimento, que es más grueso y tiene una pequeña cantidad de gelatina. Cuando se inclina la placa de prueba, el sedimento obviamente se adhiere al fondo de la taza. Es difícil fluir. Cuando se gira y se balancea, el sedimento se concentrará.
Fuerte positivo (+++): El número de células es más de 5 millones / ml: la mayor parte o toda la mezcla en el plato forma agregados gelatinosos obvios, que se adhieren casi por completo al fondo del plato. Cuando se gira el disco de prueba, aparecen los agregados. Los bultos son difíciles de dispersar.
Leche ácida (y): La leche es amarilla, rancia. (mastitis)
Leche alcalina (P): La leche es de color púrpura oscuro, acompañada de una disminución en la producción de leche (mastitis); cuando la leche se mezcla con álcali, la leche tiende a ser de color púrpura oscuro.
- Método de conductividad
- Práctica
Se utiliza principalmente para juzgar la enfermedad de la ubre del ganado.
- Principio
La conductividad de la leche de vaca está relacionada con la composición, especialmente el contenido de iones cloruro y lactosa. Cuando aumenta el contenido de iones cloruro en la leche o disminuye el contenido de lactosa, aumenta la conductividad de la leche.
Cuando la conductividad de la leche normal es generalmente 0.004-0.005S a 20 ° C. Si excede 0.006S, se puede considerar como leche enferma. Dado que la leche contiene sales, es conductora. La cantidad de iones en la leche afectará la conductividad, de los cuales los iones de sodio, potasio y cloruro son los más influyentes.
Cuando la insuficiencia de ácido láctico de la vaca o la mastitis de la leche produce ácido láctico o aumenta el contenido de sal, la conductividad es más alta que la de la leche normal. Por lo tanto, la conductividad eléctrica se puede utilizar para probar indirectamente la leche de mastitis.
- Método de viscosidad
- Principio
La viscosidad de la leche es 0.0015-0.0020 Pa.sa 20 ° C. Los factores internos que afectan la viscosidad de la leche son el contenido de grasa y proteína en la leche. Si el contenido de grasas y proteínas es alto, la viscosidad de la leche también es alta. Cuanto mayor sea el contenido de materia seca, mayor será la viscosidad de la leche. También se ve afectado por desengrase, esterilización, homogeneización, etc.
Al mismo tiempo, la viscosidad de la leche de vaca también se ve afectada por la temperatura. A medida que aumenta la temperatura, la viscosidad disminuye. Cuando la temperatura es inferior a 60 ° C, cuanto mayor es la temperatura, menor es la viscosidad; cuando la temperatura es superior a 60 ° C, la proteína se desnaturaliza y cuanto mayor es la temperatura, mayor es la viscosidad.
Además, la viscosidad del calostro, la leche y la leche enferma son todas más altas que la leche normal. Por lo tanto, la viscosidad se puede medir para reflejar indirectamente el número de células somáticas.
- Método de recuento fotoeléctrico de fluorescencia
- Principio
Las células somáticas de la leche cruda se tiñen con fluorescencia. Después de que una serie de lentes y filtros se procesan bajo una fluorescencia especial, se proyectan en la lente y luego la muestra se fotografía, se lee, se analiza y se muestra.
- Caracteristicas
- Fuerte operatividad: operación simple, uso conveniente, resultados precisos y los operadores pueden comenzar a operar después de una capacitación simple.
- Fuerte operatividad: operación simple, uso conveniente, resultados precisos y los operadores pueden comenzar a operar después de una capacitación simple.
- Fuerte operatividad: operación simple, uso conveniente, resultados precisos y los operadores pueden comenzar a operar después de una capacitación simple.
- Software de apoyo: el instrumento tiene un software estadístico incorporado para almacenar y analizar automáticamente los datos de prueba.
- FCM
- Práctica
La citometría de flujo (FCM) es una tecnología rápida, precisa y objetiva desarrollada en la década de 1970 que puede detectar y cuantificar simultáneamente múltiples características de una sola partícula (generalmente una célula). La industria láctea utiliza principalmente la citometría de flujo para detectar el número total de células somáticas y bacterias en la leche.
- Tecnología
El citómetro de flujo es un nuevo instrumento de alta tecnología que integra tecnología láser, tecnología de física electrónica, tecnología de medición fotoeléctrica, computadora electrónica y tecnología química de fluorescencia celular.
- Estructura
Su estructura se divide generalmente en 3 partes: cámara de muestra y sistema de impulsión de flujo de líquido; fuente de luz láser y sistema óptico; sistema de detección, almacenamiento y procesamiento de datos de señales.
- Principio
La solución de muestra teñida por la solución de tinción se presiona en el centro de la boquilla a través del tubo de muestra, y la solución de la vaina libre de células también se presiona en la boquilla para formar una corriente de solución de la vaina que rodea las células, de modo que las células entren en el cámara de muestra en una sola fila, intersectando verticalmente con los rayos láser (longitud de onda 488 nm) en la dirección horizontal.
El dispositivo de propulsión de flujo de líquido estable hace que la muestra se disponga en una sola fila, y cada celda pasa a través del área de irradiación láser en el mismo tiempo. Después de irradiar las células teñidas con fluorescencia, se generan dos señales. Una es la señal de luz dispersa y la otra es hacia adelante. La dispersión directa (FSC) es generalmente proporcional al tamaño de la celda; la dispersión lateral (SSC) está relacionada con la granularidad y complejidad de la celda.
La otra es una señal fluorescente, la fluorescencia emitida es directamente proporcional al sitio de unión. Los detectores ópticos correspondientes reciben diferentes tipos de señales ópticas. La señal óptica es recopilada por el sistema eléctrico, convertida en señal eléctrica y procesada por software, por lo que se obtiene el resultado de la detección.
Contador de células somáticas top 10
1. LACTOS (Perú)
- Microscopio de bajo aumento, fluorescente directo de alta gama con autoenfoque rápido y software de conteo de células.
- Análisis de células somáticas rápido, preciso y confiable de leche de vaca, oveja, cabra, búfalo y leche materna.
- Posibilidad de análisis de referencia
- Detecta mastitis clínica y subclínica
- El costo más bajo por prueba de recuentos de células somáticas
- Resultados fácilmente legibles en 20 a 60 segundos
- Toma un máximo de 60 imágenes mediante movimientos X: Y controlados por computadora y luego las procesa mediante el software de análisis de imágenes
- Almacena un número ilimitado de registros en la base de datos.
2. CellDrop de Denovix
Los contadores de células automatizados CellDrop cuentan con la tecnología patentada DirectPipette ™ para eliminar los portaobjetos de plástico y los engorrosos hemocitómetros del recuento de células de rutina. Los contadores de células CellDrop cuentan con ópticas de campo claro y fluorescencia dual, cámara de muestra de altura variable y un software de análisis potente y fácil de usar.
3. NucleoCounter de Chemometec (Dinamarca)
El NucleoCounter® SCC-100 ™ Contador de células somáticas es un citómetro de imagen de alta calidad capaz de medir el número de células somáticas en una muestra de leche con alta precisión y exactitud.
4. LACTOSCAN SCC de LACTOSCAN (Bulgaria)
LACTOSCAN SCC Contador de células somáticas se basa en una citometría de imagen fluorescente para el recuento de células en la leche. Cumple plenamente con la norma ISO 13366-1 IDF 148-1 Enumeración de células somáticas - Método microscópico (Método de referencia) con respecto a la tinción de células, en la definición de células a contar en función del tamaño y la metodología del recuento. . El contador de células somáticas ofrece control visual para excluir errores accidentales.
5. Ekomilk Horizon de EKOMILK (Bulgaria)
El Ekomilk Horizon ESSENTIAL automatizado es un contador de células somáticas que utiliza el método de viscosidad aceptado en todo el mundo para determinar el recuento de células somáticas (SCC).
6. Mrclab (Israel)
Microscopio fluorescente directo de alta gama, de bajo aumento, con autoenfoque rápido y software de conteo de células. Análisis de células somáticas rápido, preciso y confiable de leche de vaca, oveja, cabra, búfalo y leche materna.
7. Gem Scientific (Reino Unido)
El contador de células DeLaval DCC le ofrece una herramienta profesional para el diagnóstico de mastitis. Con el DeLaval Cell Counter DCC, puede probar y controlar el recuento de células somáticas directamente en la granja y obtener el resultado en menos de un minuto.
8. ADAM MC2 por NanoEntek (Corea)
ADAM-MC2, un contador celular de fluorescencia automatizado, realiza mediciones de viabilidad y recuento celular utilizando el método de tinción PI (yoduro de propidio) combinado con análisis de imagen avanzado. Solo se necesitan 25 segundos para obtener el resultado.
9. Corning (China)
El contador de células de Corning genera imágenes que se analizan automáticamente mediante nuestro algoritmo de recuento de células de última generación. Las imágenes se analizan en segundos y se pueden utilizar para contar tanto células de mamíferos como organoides.
10. AR BROWN (Japón)
SCC DUNK® son glóbulos blancos detectables principalmente y obtienen el resultado en 3 minutos. Es aplicable a muestras de leche de vaca individuales o mezcladas para monitorear vacas con mastitis clínica y subclínica y la calidad de la leche.
Conclusión
La contador de células somáticas juega un papel importante en el control de la calidad de la leche y en la detección de enfermedades en las vacas lecheras. Está relacionado con los intereses reales de los productores de leche y los fabricantes de procesamiento y venta de leche. Además, el contador de células somáticas de leche se utiliza a menudo junto con analizadores de leche. Con todo, comprando lo más avanzado y sofisticado contador de células somáticas puede ser el comienzo de ganar más participación en los beneficios.
Referencias
