Uzorak jastučića i konjugirani jastučić za ispitivanja bočnog protoka

Bočni imunološki test (imunološki testovi lateralnog toka) glavni je oblik testa brige (POCT), čija je suština i dalje imunološki odgovor antigena antitijela. Međutim, tradicionalna metoda je postavljanje reakcije antigena antitijela na ploču sa 96 jažica ili na površinu magnetskih mikrosfera, dok lateralna imunokromatografska detekcija postavlja imunološku reakciju u poroznu nitroceluloznu membranu (NC membrana). Stoga se naziva i otkrivanje test traka.

Glavne komponente imunološkog otkrivanja lateralnog toka uključuju upijajući papir, hromatografsku membranu, konjugiranu podlogu i podlogu za uzorke, te osnovnu plastičnu ploču koja podržava sve materijale. Tečni uzorak dodaje se iz jastučića za uzorke i teče prema strani upijajućeg papira. Prilikom prolaska kroz konjugirani jastučić, imunološke sonde (koloidno zlato, fluorescentne mikrosfere itd.) Na konjugiranom jastučiću se oslobađaju i reagiraju s analitom u uzorku tijekom procesa protoka, a zatim se fiksiraju na liniju detekcije na NC membrana (Linija za testiranje) Antitijelo hvata i agregira kako bi formiralo optički signal.

Analize bočnog protoka nastao devedesetih godina prošlog veka. Uz stabilnost tehnologije pripreme koloidnog zlata, razvila se brza dijagnostička metoda razvijena zajedno s imunološkim ispitivanjem. Prema razvoju sondi, tehnologija ispitivanja lateralnog protoka prošla je kroz tri glavne faze: koloidno zlato, obojene lateksne mikrosfere i fluorescentne mikrosfere. Shodno tome, rezultati detekcije su također prošli kroz tri faze: kvalitativnu, polukvantitativnu i kvantitativnu.

Jastučić za uzorak može se koristiti za obavljanje više zadataka, od kojih je najvažniji promicanje ujednačene i kontrolirane raspodjele uzorka na konjugiranoj podlozi. On također kontrolira brzinu kojom tekućina ulazi u konjugirani jastučić, čime se sprječava prelijevanje uređaja. Kada su impregnirani proteinima, deterdžentima, ljepljivim tvarima i puferskim solima.
Općenito postoje dvije vrste materijala koji se koriste kao jastučići za uzorke: filtri od celuloznih vlakana i tkana mreža.

Dodavanjem usporivača na jastučić za uzorke može se ukloniti zaostajanje membrane. Ova metoda može biti lakša i isplativija od pokušaja izravne blokade membrane. Osim ako je antitijelo (ili antigen) kovalentno vezano za čestice detektora, u prisutnosti blokirajućih proteina ili deterdženata, preporučuje se da se detektorski reagensi ne suše u vezivnoj podlozi.

Povećajte viskoznost uzorka (prilagodite karakteristike protoka).
Povećajte sposobnost uzoraka da otope reagense za detekciju.
Spriječite nespecifično vezivanje konjugata i analita za bilo koji nizvodni materijal.
Izmijenite kemijska svojstva uzorka kako biste ga učinili kompatibilnim s imunološkim kompleksom na testnoj liniji.
Promovirati ujednačen protok uzorka duž membrane.
Dodatak proteina i deterdženata i tenzida može potaknuti ponovnu konjugaciju konjugata, smanjiti vezivanje nespecifičnih veziva i može minimizirati adsorpcijsku membranu analita.

Konjugirani jastučići mogu obavljati više zadataka, od kojih je najvažniji jednoličan prijenos reagensa za detekciju i testnih uzoraka na membranu. Kada se uzorak ulije u konjugiranu podlogu, reagens za detekciju se otopi, podigne materijal jastučića i zajedno s uzorkom pređe u membranu.
Važna funkcija konjugiranog jastučića je dopremanje čestica ispitnog sredstva kao konstantnog volumena uzorka na svakoj test traci do membrane.

Nisko nespecifično vezivanje. Ako se reagens za detekciju ili analit vežu za vezni jastučić, neće moći formirati imunološke komplekse na ispitnoj liniji, čime se smanjuje snaga signala i osjetljivost.

Dosljedne karakteristike protoka. Nedosljedne karakteristike protoka mogu uzrokovati ozbiljne probleme u radu. Ako materijal ne uspije jednolično nanijeti uzorak na membranu, reagens za detekciju može biti usmjeren na membranu i mogu se pojaviti pruge dok se uzorak migrira duž membrane. Stoga će se neujednačeni signali pojaviti na ispitnim i kontrolnim linijama.

Volumen kreveta je dosljedan. Prilikom stavljanja u konjugirani jastučić potapanjem, količina reagensa za detekciju u svakoj test traci ovisi o volumenu sloja materijala. Ako volumen sloja jako varira, primijetit će se promjenjiva jačina signala čak i ako sve ostale komponente trake ostanu nepromijenjene.

Niski ekstrakt. Osim kemijskih ekstrakata, materijal bi trebao biti i bez čestica koje mogu blokirati membranu na sučelju konjugiranog jastučića / membrane.

Dobre karakteristike obrade weba i dosljedna kompresibilnost. Ovi atributi su vrlo važni za uključivanje proizvodnje test traka i stabilan prijenos tekućine na membranu.

Obje se koriste za spremanje različitih uzoraka. Konjugirani jastučić je nosač za označavanje proteina, dok je jastučić za uzorak nosač za predtretman biokemijskih otopljenih tvari. Stoga, uzimajući u obzir dugotrajni suživot s proteinom, konjugirani jastučić može održavati samo neutralni pH, nisku koncentraciju iona soli, itd., Kako bi stvorio dobro okruženje za očuvanje proteina. Jastučić za uzorke suočen je sa složenijim rješenjem uzorka, pa zahtijeva veće mogućnosti predtretmana i filtriranja.

Iz perspektive tehnologije označavanja, ispitivanje bočnog protoka prošlo je nekoliko faza, poput koloidnog zlata, obojenih lateksnih mikrosfera i fluorescentnih mikrosfera. Osim toga, posljednjih godina razvijena je fluorescencija kvantnih točaka i magnetske čestice. Mikrosfere koloidnog zlata i lateksa uglavnom se procjenjuju golim okom radi promjene boje, općenito samo radi kvalitativne detekcije, te je potrebno surađivati ​​s instrumentom kako bi se postigla polukvantitativnost. Uz pomoć pojačanja fluorescentnog signala i fluorescentnog analizatora za očitavanje intenziteta fluorescencije, fluorescentne mikrosfere već mogu postići kvantitativnu detekciju, što je glavni tok današnjeg razvoja.

Imunohromatografska metoda lateralnog toka je brza metoda imunološkog ispitivanja koja kombinira imunologiju i hromatografiju. Uglavnom se koristi za otkrivanje patogena, hormona, lijekova i metabolita. Princip je identifikacija antigena ili antitijela označavanjem objekta inspekcije.
BALLYA posvećen je istraživanju bioloških nauka i ima svoje duboko iskustvo i iskustvo u upotrebi lateralne imunohromatografije. Koristeći lateralnu imunohromatografiju, Ballya je uspješno razvila niz komplet za brzi test za mliječne proizvode, med, vodene proizvode, pesticide, falsifikate, bolesti kućnih ljubimaca i bolesti stoke. U budućnosti, Ballya će nastaviti provoditi dublja istraživanja o više aspekata testiranja.